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    氟伐他汀(Sandoz Compound XU 62-320)。一种人工合成的HMG-CoA还原酶抑制剂。通过飞蝗咽侧体,检测在体外和体内抑制保幼激素(JH)的生物合成能力。氟伐他汀抑制咽侧体在体外合成JH。氟伐他汀抑制外源性甲羟戊酸内酯在咽侧体还原JH的生物合成。氟伐他汀注入蝗虫体内抑制JH生物合成,但最大抑制时间仅持续6小时。在JH调节变态以及卵母细胞成熟方面都没有明显作用。据观察,增加剂量(单次或多次注射)导致的第四幼虫期的延长是致命的。© 学术出版社,34788
    甲羟戊酸的合成,通常被认为是类异戊二烯生物合成的第一个步骤,是通过酶催化3-羟基-3甲基戊二酰基CoA还原酵素(HMG-CoA还原酶,EC1.1.1.34)所得。由于这种酶在脊椎动物体内胆固醇生物合成调控的关键作用,因此它一直是许多研究的主题。昆虫缺乏角鲨烯合酶不合成甾醇(Clayton, 1964).。然而,类异戊二烯通路存在于昆虫组织,至少存在于咽侧体。在昆虫中,法尼基焦磷酸只能在咽侧体通过五个酶促步骤转换成保幼激素(JH)(见 Schooley and Baker, 1985)。JH是变态和生殖调控的关键(见 Feyereisen, 1985)。论文网
    咽侧体生物合成JH的速率由外部来源和内部来源两方面进行复杂的调控(见 Feyereisen, 1985)。神经内分泌调节剂刺激(Kataoka et  al., 1989)或抑制(Pratt et al., 1989, 1991;Woodhead et al.,1989; Kramer et al., 1991)JH生成是已知的,但将刺激或抑制信号转换为更高或更低的JH生物合成率的机制是未知的。甲羟戊酸的生成似乎对JH生物合成的调节起着至关重要的作用(Kramer and Law,  1980; Law and Monger, 1982; Bhaskaran et ,al.,  l987;  Feyereisen and Farnsworth, 1987a:Couillaud and Feyereisen,  1991; Couillaud and Rossignol, 1991),但咽侧体HMG-CoA还原酶是否参与调控尚不清楚。对甲羟戊酸的体内形成具有效果的抑制剂,将会是参与调查甲羟戊酸生成对JH生物合成调控的有用工具。
    对昆虫中使用HMG-CoA还原酶抑制剂的研究是稀少的。JH在体外完好的咽侧体的生物合成受到康百汀(Monger et al., 1982; Edwards and  Price, 1983; Belles et al., 1988)或洛伐他汀(Feyereisen and Farnsworth, 1987b; Couillaud, 1991)的抑制。然而,应用单剂量局部或通过注射(Monger et al., 1982; Edwards and Price, 1983)无法看出体内康百汀抗JH的影响。重复向注射烟草天蛾幼虫注射,会使该物种由于JH缺乏而催生黑色素沉着(Monger et al., 1982)。氧化代谢可引起体内康百汀的低效力。因此,代谢更稳定的HMG-CoA还原酶抑制剂在体内将是有用的JH合成调节剂(Schooley and Baker, 1985)。为了确定这种化合物,氟伐他汀的干预作用,已经通过施加于动物或直接加入体外培养基,来审查非洲蝗虫的JH生物合成速率。氟伐他汀是Sandoz公司研究所最近开发的并且与康百汀/洛伐他汀结构不相关的一种人工合成的HMG-CoA还原酶抑制剂(Kathawala. 1991)。
    材料和方法昆虫蝗虫饲养于30℃拥挤的条件下。每天早上用小麦和麦皮喂养它们。
    化学
    消旋甲瓦龙酸内酯(甲羟戊酸内酯)和JH - 3从Sigma(Taufkirchen. 德国)购买。L-[甲基-14C]蛋氨酸从国际公司(白金汉郡,英国)购买。氟伐他汀是来自Dr. F. Kathawala (Sandoz研究学院,汉诺威,新泽西州)的礼物。
    JH生物合成
    JH生物合成率使用由Pratt 和 Tobe开发的放射化学测定法在体外测定(1974)。本文已经在L.飞蝗得到了广泛的验证(Girardie et al., 1981; Mauchamp et al., 1985)。咽侧体在28℃进行解剖以及在培养基(100µl: Flow Laboratories, Irvine, UK)中用蔗糖(20 mg/ml, Sigma, Taufkirchen, Germany)和L-[甲基-14C]蛋氨酸(final concentration, 0.3 mM, final specific activity, 1.5 GBq/mmol)培育3小时。在一系列实验中,咽侧体来自已注射氟伐他汀的动物,但在其他实验中,咽侧体来自未经处理的动物,试验化合物(氟伐他汀和甲羟戊酸内酯)直接添加到培养基水溶液。经过繁殖以后,以上两者,培养基和咽侧体,都用氯仿提取。JH - 3在二甲苯/乙基乙酸酯(4/1)溶剂系统中通过二氧化硅薄层色谱(Merck, Ref5735,  Darmstadt, West Germany)分离。从薄层塑料板切割而来的放射性组分用液体闪烁计数测定(Beckmann  LS 2800 spectrometer; Palo Alto, CA)。
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