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摘 要：巯基小分子广泛存在与生物体系中，它们对生物体尤其是人体细胞的的新陈代谢起着至关重要且又无可替代的作用。是故，定量的去测定细胞内巯基小分子浓度是非常重要的，对研究细胞功能更是至关重要。荧光探针检测技术很受大家关注和欢迎，它可以实时检测且选择性好、灵敏度高更有操作简便等优点，是一种新型的检测手段。本文介绍了检测巯基小分子荧光探针的不同分类、荧光探针识别原理及其合成过程，并对下一步的研究工作进行了安排，同时就该研究领域的未来发展方向进行了展望。40037
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毕业论文关键词：荧光探针；巯基；合成；原理；展望
The Design and Synthesis of Small Molecular Fluorescent Probe for Thiols
Abstract：Intracellular small-molecular-weight mercapto biomolecules play important roles in maintaining biological systems．Therefore， the quantification of the concentration of intracellular mercapto biomolecules is of great significance for studying cell function．Fluorescent probes technique was popular welcome．It is high sensitive，selective，can be real-time detected and more simple to operate，which is a new ways of detection．In this paper，the classification of fluorescent probe detecting mercapto biomolecules、the recognition mechanism and synthesis of fluorescent probe were introduced and the next research work was arranged．Meanwhile，in the future，the possible development trend was extremely prospected．
Key Words：Fluorescent probe；Thiols；Synthesis；Principle；Prospect
目 录
摘 要 1
引 言 1
1 检测巯基小分子荧光探针分类 2
1.1马来酰亚胺类 2
1.2醛基类荧光探针 3
1.3以二硫键为巯基反应基团的荧光探针 3
1.4碘乙酰胺类(-NHCOCH2I) 荧光探针 3
1.5其他类检测巯基小分子的荧光探针 3
2 荧光探针识别机理 3
2.1光诱导电子转移(PET)原理 3
2.2 分子内电荷迁移(ICT)原理 4
2.3 荧光共振能量转移(FRET)原理 4
3 实验部分 5
3.1 仪器与试剂 5
3.2 实验方法 5
4 下一步工作计划及展望 7
4.1 下一步工作 7
4.2 展望 7
参考文献 7
致 谢 10
测定巯基小分子荧光探针的设计与合成
引 言
生物体内存在着很多种巯基小分子，且大多数巯基小分子能文持生物体内尤其是细胞内化学反应的动态平衡状态。它们的含量过高或过低都会引起一系列相关的疾病。例如半胱氨酸(Cys)是一种人体自身不能合成必须从外界摄取的必需氨基酸，缺乏它将会引起一系列疾病，如皮肤白化受损，头发脱落，婴儿生长发育缓慢等。高半胱氨酸(Hcy)含量过高会导致老年人痴呆症，外周血管疾病、神经系统退行性疾病、 糖尿病、肝硬化、慢性肾病、骨质疏松等疾病[2]。还原型谷胱甘肽(GSH)是人类细胞中自然合成的一种三肽，是由三种氨基酸组合而成，它可以使生命体内的化学反应环境处于稳定状态, 这些反应主要包括生物体细胞内的异物代谢反应和一些氧化还原反应。更重要的是它还可以调控生物的基因,传导生物信号[3]，人体中还原型GSH浓度偏离正常值时将会诱发一系列疾病。例如一些心脑血管疾病、癌症等[2, 4]。是故，定量的去检测生命体中的巯基小分子对生物医学意义重大。
现阶段，有各种各样检测巯基小分子的方法[5, 6]，这些方法各自有各自的优点，然而也都有自己的不足[7, 8]。我们主要使用的是荧光法[9]，它相对于与其他方法具有很多明显的优点，比如适用范围非常广、操作起来简单方便、有很好的灵敏度和选择性，并且可以进行原位分析。本文主要介绍了几种不同的分类以及怎样去设计和合成这些探针，同时也介绍了它们的作用原理。并就下一步的研究工作计划进行了相应的安排，同时对该研究领域的发展方向也提出了一些自己的建议和看法。