2.2 紫外波长的确定
取芦丁、槲皮素、儿茶素、橙皮素标准溶液,用紫外/可见分光光度计于180~330nm波长范围内,以1nm为单位进行全波长扫描,得到吸收曲线。根据已经得到的吸收曲线确定检测波长[15-16]。
2.3 色谱条件
色谱柱:C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-磷酸水溶液[磷酸-水(2:500)](45:55);流速:1.0mL/min;检测波长:280nm;柱温:常温[14]。
2.4 黄酮类化合物的提取
取冷冻干燥过的花,经粉碎机粉碎,称取一定质量的花置于锥形瓶中,加入一定体积的65%乙醇(迎春花0.5g/50mL,枇杷花5g/50mL,桂花75g/500mL,野菊花60g/700mL,腊梅75g/400mL),用超声波提取法提取20min(超声波提取设定:温度30oC、料液比为1:40)。用离心机离心沉降分离(设定转速2000r/min),取上层清液置于容量瓶,用65%乙醇定容至刻度线,使其成为一定浓度的样品提取液(迎春花10mg/mL,枇杷花100mg/mL,桂花150mg/mL,野菊花86mg/mL,腊梅188mg/mL),密封容量瓶,保存于冰箱,作为待测样品[17-19]。