1。1。4 植物多糖的提取方法
(1)水提醇沉法
水提醇沉法是提取多糖最常用的方法。多糖是极性大分子化合物,根据相似相容原理,应使用水、醇等极性较强的溶剂,利用多糖溶于水而不溶于醇的性质,可以采用热水浸煮或冷水浸提渗滤提取多糖,用乙醇将多糖从提取液中沉淀出来,即为水提醇沉法。一般来说,醇含量在50%~60%可以去除淀粉,在75%时可除去蛋白质,在80%时基本可以除去全部蛋白质、多糖和无机盐[1]。
(2) 酶解法
酶解辅助提取是利用酶反应的高度专一性的性质,将植物细胞壁水解或降解,使得有效成分充分释放而被提取的方法,常用的酶有纤维素酶、蛋白酶等。此法特别适用于有效成分含量很低,或是溶剂影响大易发生结构变化的植物有效成分的提取。目前将酶解与各种技术连用提取多糖,可以提高粗多糖的提取率,如超声酶法提取、酶法与膜分离技术结合等[7]。
(3) 酸碱法
酸提法是用适宜浓度的乙酸或盐酸溶于含葡萄糖醛酸等酸陛基团的多糖中,再用乙醇将多糖沉淀析出,也可加入铜盐使多糖生成不溶性络合物或沉淀析出。但是酸性条件下可能引起多糖糖苷键的断裂,因此应使用弱酸为宜[2]。此外还应注意控制酸作用的时间,否则会降低多糖提取率。碱提法是用弱碱性溶剂提取含有糖醛酸的多糖的一种方法。为防止多糖降解,常通人氮气或加硼氢化钠[8]。
1。2金银花简介
金银花为忍冬科植物,在神农本草经中被列为上品,其性寒,味甘,有清热解毒,凉散风热的用处。用于医治温病发热,发热感冒,痛肿师毒,热毒血病。金银花富含挥发油类,有机酸类化合物及三菇类,环烯酿菇类,醇类,微量元素等[3]。文献综述
实验表明,挥发油是金银花中疏散风热主要物质基础之一, 从干花挥发油中鉴定出65个化合物,占挥发油的94。42%,其中棕榈酸占26。36%,十八碳二烯酸乙酯占9。86%,二十四碳酸甲酯占8。44%;从鲜花挥发油中鉴定出52个化合物,占90。46%,其中芳樟醇为14。15%,芳樟醇氧化物为10。46%。有机酸类被认为是金银花清热解毒的药理基础,目前常以绿原酸作为金银花的质量控制指标。木犀草素是最早从金银花当中提取出的黄酮类有效成分,其次为忍冬苷。用色谱法和光谱技术也分离鉴定出木犀草素、槲皮素等。研究发现不同时期的金银花修剪枝各部位均含有黄酮且都是节部和叶片含量最高,花中次之,茎含量较低。从90年代起,我国学者就不断从金银花中提取出三萜皂苷类化合物,最早从金银花中分离出一个新的含有六个糖基的三萜皂苷。然后又分离得到3个三萜皂苷,此后又发现了2个新的双咖啡酰基奎尼酸酯化合物。从吊子银花正丁醇萃取物中亦分离得到4个三萜皂苷类成分,其中3个与灰毡毛忍冬中所含皂苷相同。即川续断皂苷乙,灰毡毛忍冬皂甲和乙,另一个为木通皂苷D。环烯醚萜苷类是金银花中另一有效成分,在金银花中含量高而且有较强的抗炎、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤及保肝作用,从金银花中分离得到一个新的裂环环烯醚萜苷,命名为dehydromorroniside[3]。该化合物为忍冬属中发现的第3个morroniside-型裂环环烯醚萜苷。 金银花中的微量元素,对人体健康、生长发育和防病治病有着密切的关系。金银花当中含有很多微量元素,赵庆华等通过火焰原子吸收法测定了金银花的微量元素,发现金银花中K和Cr含量最高,也有一定量的Cu元素。有学者发现多种金属络合物有抗菌抗病毒抗炎抗肿瘤作用可能金银花有抗菌抗病毒抗炎解毒等作用,与这些金属在人体内生成的金属络合物有关。从该植物花蕾中发现槲皮素、齐墩果酸和胡萝卜苷[1]。在其功能上金银花对多种致病菌均有一定的抑制作用,水浸剂比煎剂作用强,金银花与连翘或青霉素合用有协同或相加作用,可能抑制了细菌体内蛋白质合成,绿原酸、异绿原酸及木犀草素可能是其抗菌的有效成分。金银花有明显的抗炎作用,金银花还对人的γ-球蛋白的Cu2+热变性作用有显著抑制效果[3]。