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    目前测定食品中甲醛的方法有多种。如气相色谱法[8]、高效液相色谱法[9-11]、电化学法[12]、化学发光法[13]、萃取法[14]、分光光度法[15] 、荧光法[16,17]等。荧光法选择性好,但应用范围较窄;化学发光法选择性好,成本低,但重复性不高;色谱法操作简便,选择性好,但仪器昂贵;萃取法操作复杂,重现性不好;电化学法易受干扰。分光光度法是基于不同分子结构的物质对电磁辐射的选择性吸收而建立的一种定性、定量分析法,是居室、纺织品、食品中甲醛检测最常见的一种方法。催化光度法是分光光度法的一种,具有仪器设备简单,操作简便且灵敏度高等特点,用于甲醛的测定已有报道[18-22]。但甲醛催化过氧化氢氧化茜素红反应的体系用于甲醛的测定,尚未见有报道。
    本文采用甲醛在HAc-NaAc的缓冲体系中,甲醛对过氧化氢氧化茜素红有良好的催化作用,使茜素红体系明显褪色。用分光光度计测定催化体系与非催化体系的吸光度差值ΔA,ΔA与甲醛浓度具有线性关系,根据线性关系对样品中的甲醛进行测定。
    1 实验部分
    1.1 仪器和试剂
    V-530紫外可见分光光度计(日本分光株式会社);S22PC分光光度计(上海棱光技术有限公司);AL204电子天平(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司);HH-S6恒温水浴锅(巩义市予华仪器有限责任公司)。
    甲醛标准储备液:1mg/mL(甲醛标准储备液的准确浓度用碘量法标定);甲醛标准使用液:使用时将甲醛标准储备液逐级稀释;过氧化氢:由市售30%的过氧化氢稀释成10%;茜素红:1.0×10-3mol/L;醋酸-醋酸钠(pH=5.0),以0.2mol/L醋酸和0.2mol/L的醋酸钠配置而成。试剂均为分析纯,实验用水为二次蒸馏水。
    1.2 实验方法
    取两支25mL的具塞比色管,分别加入一定量的pH=5.0的醋酸-醋酸钠缓冲溶液,1.0mL的茜素红,1.3mL的过氧化氢溶液,向其中一支比色管加入一定量的甲醛,摇匀。置于30℃的恒温水浴中加热19min(用秒表计时),迅速取出,用流水冷却一段时间,再加入0.2 mL 0.5 mol/L盐酸羟胺溶液停止反应,用1cm比色皿,以蒸馏水为参比,在分光光度计上于450nm处测定吸光度值A0(非催化体系)和A(催化体系),并计算ΔA(ΔA=A0-A)。
    2 结果与讨论
    2.1 吸收光谱
    按实验方法制备试液及空白对照的溶液,测量体系的吸收光谱如图1所示。二者峰形相似,但加入甲醛后,体系的吸光度明显降低,表明甲醛对催化过氧化氢氧化茜素红的体系有强烈抑制作用。在最大吸收峰450nm处两体系的ΔA最大,故本法选450nm为测量波长。
     图1 吸收曲线
         1:HAc-NaAc+H2O+茜素红          2:HAc-NaAc+H2O+茜素红+甲醛
    2.2 温度的影响      
    按实验方法,分别测定水浴温度为20℃、30℃、40℃、50℃、60℃, 70℃时两体系的吸光度,得出ΔA。实验结果如图2所示
                                        图2 温度与吸光度差
    结果表明:反应时水浴温度在20℃~70℃的范围内,体系的ΔA先随反应时水浴温度的增加而增大,当反应时水浴温度为30℃时,ΔA的值达到最大。当反应时水浴温度超过30℃时,体系的ΔA值随反应水浴温度增加而降低。说明在30℃时甲醛对此褪色反应的催化效果最好,所以选择反应时的水浴温度为30℃。
    2.3 反应时间的影响
    取两支25mL具塞比色管,按实验方法进行试验,置于30℃的恒温水浴锅中加热,流水冷却后在450nm处测定两者吸光度,算出ΔA,实验结果如图3所示
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