摘要: epichloaë内生真菌能够增加宿主分蘖和生物量。本实验利用热处理,建立含菌与不含菌的鹅观草体系,经过田间栽培试验,调查分析后发现,含菌(EI)鹅观草植株生长较旺盛,茎秆直径,叶宽与不含菌植株(EF)相比有着显著差异,但株高间无明显差异。分蘖在统计学上没有差异,只是在越冬期前后出现细微差别。同时利用双向电泳技术(2-DE),研究EF与EI鹅观草植株体内蛋白组。在试验过程中,找到了一个适合鹅观草蛋白提取的方法以及适合鹅观草体系的双向电泳条件,共找到21个有显著差异的蛋白点。以此为找到他们表观差异的原因及后续实验打下基础。86093

毕业论文关键词:内生真菌;鹅观草;双向电泳;蛋白差异

Effects of Endophytic Fungi on the Growth of Roegneria kamoji and their Proteomic Differential Expression Profiles

Abstract: Some epichloaë endophytic fungi could improve biomass and tillers of host。 By heat treatment, endophyte-infected (EI)and endophyte-free (EF)Roegneria kamoji plants were established。 After field test, we found that EI R。 kamoji plants grow more vigorous and width of the pseudostems and leaves were wider, but there was no significant difference between the plant height。 There was no differences in the tiller statistically, but different during overwintering period。 At the same time, two-dimensional electrophoresis (2-DE) was used to determine the difference of proteins between EF and EI plants。 A suitable method for extraction of lemongrass protein and two-way electrophoresis conditions suitable for the system were conducted。 Total of 21 protein spots with significant differences were found。 These results provides probes for future study on phenotype differences。

Key words: endophytic fungi;Roegneria kamoji;two-dimensional electrophoresis; difference of protein

目  录

摘要1

关键词1

Abstract1

Key words1

引言(或绪论)1

1材料与方法2

1。1 材料处理 2

1。2 田间试验3

1。3内生菌检测3

1。4蛋白质组实验3

2结果与分析5

2。1田间试验数据5

2。2 内生真菌检测结果7

2。3 蛋白质组实验结果8

3结论与讨论9

致谢9

参考文献10

内生真菌对鹅观草生长的影响及其蛋白质组差异的研究

内生真菌(Endophyte)的一部分或全部生活史定殖在植物组织器官中,且宿主植物无明显感染症状。内生真菌与宿主植物之间互利共生,内生真菌为植物带来多种有益性能,如抗寒能力、抗旱能力、抗虫能力、抗病能力、抗线虫能力,还能促进植物的生长、分蘖,提高其竞争能力,促进苗期生长和恢复再生,促进植物对土壤残留有效磷和氮素的利用以及提高光合作用,提高植物产量等。但其也有一些不足的地方,有时也会使宿主植物生产过量的生物碱,造成家畜中毒等不良现象[1]。

传统的共生机理研究多集中在少数基因的转入和表达领域,难以揭示内生真菌的综合机理,尤其在一些抗逆等方面。蛋白质是各项生理功能的执行者,是生命现象的直接体现者,因此利用蛋白质手段对蛋白质结构和功能的研究可以直接阐明内生真菌在植物遭受胁迫等条件下的变化机制[2]。

双向凝胶电泳技术是研究蛋白质核心技术之一,但此法仍具有重复差、样品上样量相对较少且制备困难、低丰度蛋白质很容易被高丰度蛋白所掩盖、一些相对分了质量高或极酸、极碱的蛋白质无法分离等不足之处[2]。国内对内生真菌进行蛋白方面的研究还是比较有限的,在对以含内生真菌的植物为材料研究其蛋白质表达的差异的研究更是少之又少,在对含有内生真菌的植物的蛋白质的研究只局限于对一些特定的蛋白的具体研究中[3],目前并没有适用于所有植物的普遍标准方法,由于针对不同的植物相同实验条件对结果会有不同的影响,因此需要针对不同植物不同物种不同器官的特性进行实验方法的建立与优化[4, 5]。

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