SZA006 头孢哌酮 QC016 阿米卡星 SZB0011 诺氟沙星
SZA007 头孢噻肟 QC017 庆大霉素 SZB0012 环丙沙星
SZA008 头孢曲松 SZB001 苯唑西林 SZB0013 左氟沙星
SZA009 头孢吡肟 SZB002 青霉素G SZB0014 多粘菌素B
SZA0010 头孢他啶 SZB003 红霉素 SZB0015 复方新诺明
SZA0011 头孢西叮 SZB004 大观霉素 SZB0016 呋喃妥因
SZA0012 氧氟沙星 SZB005 克拉霉素
1。1。3。 仪器设备
超净工作台(苏州净化)、高压灭菌锅(上海博迅医疗设备厂)、SPX-250B-Z型生化培养箱(上海博迅医疗设备厂)、THZ-C恒温振荡器(太仓市实验设备厂)、-80℃冰箱(日本Sanyo公司)、PCR仪(杭州BIOER科技有限公司)、微量移液器(德国Eppendorf公司)、离心管(上海生工)、接种环/针(上海生工)。
1。1。4。 实验试剂
水、马铃薯、葡萄糖、酵母提取物、胰蛋白胨、酪蛋白胨、氯化钠、氯霉素、牛肉浸取物、乙酸钠、柠檬酸三胺、吐温80、磷酸氢二钾、七水硫酸镁、七水硫酸锰、琼脂、琼脂糖、核酸电泳缓冲液(TAE)、Tap酶、无水乙醇等。
注:以上试剂皆为分析纯(AR),购自上海生物工程有限公司
1。2。 培养基的配置
① PDA固体培养基配方:
马铃薯(去皮) 200 g
葡萄糖 20 g
琼脂 20 g
水 1000 mL
氯霉素 0。10 g
将马铃薯去皮、洗净、切成小块,称取200 g加入1000 mL蒸馏水,煮沸30 min,再用双层纱布过滤2次,滤液补足水至1000 mL,再加入糖和琼脂,溶化后分装,于自然pH,121℃湿热灭菌20 min。另外,在倒平板之前,培养基约50-60 ℃时,用少量乙醇溶解0。10 g氯霉素,加入1000 mL培养基中。文献综述
② LB固体培养基配方:
胰蛋白胨 10 g
NaCl 10 g
酵母提取物 5。0 g
水 1000 mL
琼脂 20 g
称取胰蛋白胨10 g,NaCl 10 g,酵母粉5。0 g,琼脂20 g,加入适量水,加热,充分溶解后补足水到1000 mL,分装到锥形瓶内,用NaOH调节pH至7。0-7。2,121 ℃湿热灭菌20 min。