表1总结了各种试验条件。在活性测定中加入NaNO2和（NH4）2SO4（二者均为100 mgL-1）（图1）。每个结束时，注入50 mgL-1NH4+-N和NO2--N以测定anammox活性（SAA）。随后，取出5 mL anammox颗粒污泥进行血红素测定，5 mL污泥用于EPS提取。

1。3血红素提取和测定

将5 mL的anammox颗粒污泥在4℃3000 g的条件下，离心5min，然后用磷酸钠缓冲液（10 mM，pH7。5）洗涤两次。洗涤后加入25 mL的相同缓冲液中并通过超声处理破碎（800 W，在4℃下20 min，超声波处理器CPX 750，美国）。细胞在4℃下离心（15,000 g）15 min。另外，根据Berry and Trumpower所述的方法测定heme含量。

1。4 EPS提取

EPS提取采用热提取方法。多糖（PS）测量以葡萄糖标准物使用硫酸蒽酮方法，蛋白使用以牛血清白蛋白作为标准物的改进的Lowry方法。

1。5生物衰减速率的测定

生物衰减速率基于减量在厌氧饥饿中的VSS水平。根据一阶指数衰减模型，该模型广泛适用到活性污泥系统，如硝化和anammox系统，衰减率使用公式（1）计算。

bAN=（lnVSSt/VSS0）/t                  （1）

其中VSSt是在饥饿后的VSS（gL≥1），VSS0是饥饿前的VSS（gL-1），bAN是衰减速率（d≥1），t是饥饿时间。

表1 适用于每批实验的条件汇总

实验 饥饿时期 (30 d)

浸没在含磷酸盐缓冲液的无机盐中，第10天和第20天注入基质

浸没在无机盐中，第28天没有注入基质和磷酸盐（1mM）

浸没在无机盐中，第28天没有注入基质和磷酸盐（50mM）

浸没在无机盐中；第10天和第20天注入基质，第28天注射磷酸盐（1mM）

浸没在无机盐中第10天和第20天注入基质，第28天注射磷酸盐（50mM）

图1活性测定使用的实验方案文献综述

如上图所示方案1-3：具有或不具有磷酸盐的持续饥饿;方案4-6：间歇饥饿有或无磷酸盐;使用持久性；方案7-8：间歇性静息细胞；方案9-10：预暴露于磷酸盐。

时间（d）所示。从指数衰减方程 （1），定义为半寿命（THL）如式 （2）

tHL=ln2/bAN                                              （2）

1。6分析方法

氨氮，亚硝酸盐，pH，悬浮固体（SS）和VSS使用标准方法测定。

1。7统计分析

所有生理和物理化学指标一式三份，结果表示为平均值±标准差。方差分析用于分析结果的差异性，统计学上p<0。05表示显著显着。Pearson相关分析以确定anammox的生理和物理化学方面的颗粒特性。