植物种子的休眠是一个复杂的问题，不同植物具有不同的休眠特性，检测方法也不尽相同。本实验室一直从事种子次生休眠的研究，已发明了成熟油菜种子次生休眠特性的PEG化学检测方法，但此方法并不完全适用于水稻种子的次生休眠检测。因此，找到一种适用于检测水稻种子次生休眠的方法显得尤为重要。

2 材料与方法

2。1 实验材料

本实验以江苏、浙江、安徽、辽宁等我国主要的水稻产区的76个水稻品种(品系)的成熟种子为材料，探究我国水稻品种次生休眠特性的遗传多样性。

2。2 水稻种子次生休眠检测

取100粒各品种水稻成熟种子放入垫有双层滤纸的培养皿中，注入10ml去离子水浸泡，同时做4～8 组平行样；将培养皿装入纸盒子在8℃黑暗条件下保存14天，诱导种子次生休眠。完成后在500～600 nm 绿色安全光照下将种子清洗后转移到装有10ml去离子水的培养皿中，继续在25℃黑暗条件下保存，非休眠种子将发芽；在500～600 nm 绿色安全光照下剔除发芽的种子；所有剩下的种子清洗后再换入装有8ml 3%的双氧水的培养皿中处理，如果能够发芽，则属于次生休眠种子，计算种子休眠率。

2。3 水稻次生休眠种子中可溶性总糖、淀粉提取与含量测定文献综述

采用硫酸蒽酮法测定可溶性总糖含量；碘显色法测定淀粉含量。具体提取和测定过程如下，所得结果为三次重复的平均值。

可溶性总糖含量测定：将水稻种子剥皮，过100目筛，称取0。1g样品，加入10ml 80%乙醇80℃水浴30min，冷却后以转速为2000rpm/s离心15min，将上清液与残渣分离，向残渣中加入10ml 80%乙醇重复上述步骤三次，合并三次离心后的上清液并定容至50ml。用移液管吸取上述提取液1。0ml至试管中，加1。0ml水和0。2%的蒽酮4ml，沸水浴15min，待冷却后，以去离子水校零，测其波长为620时的OD值。

淀粉含量测定：取样品 0。1g，用5ml 80%乙醇研磨离心，残渣加 10ml 硝酸钙溶液，沸水浴悬浮浸提 10min，重复两次，合并上清液，定容至 25ml。吸取 4ml 提取液于另一洁净试管中，分别加入0。2ml I2-KI溶液，摇匀，于620nm波长下比色，测定吸光度值。