七叶一枝花总黄酮提取工艺的研究(2)
在传统的总黄酮提取工艺中，一般采用水提法或者有机溶剂浸提等常规方法，这些方法提取效果差且提取率低。传统的加热方式中，由于加热方式的限制，使得能量只有通过介质传导，能量是从外部传导到内部的，加热时间和耗能方面都有很大的浪费[3]。而微波能直接作用于样品的基体内，促进了分子的转动运动，所以微波提取更加快速。分子具有一定的极性，如果在一定的微波作用下，分子内和分子之间的键就会发生振动、碰撞、撕裂、摩擦[3]。所以微波可以使分子快速升温所以微波提取的优势主要是加热速度快，物料的受热时间短，消耗的能量大大降低。
响应面法的原理是依据一个多元二次回归方程，在多因子实验中通过拟合多个因素与响应值的关系，来估计回归方程的系数以及对该方程求极值最终达到优化参数的目的[4]。与正交设计法相比，响应面法的优势在于可以在整个研究区域上找出各因素的最佳组合及响应值的最优值，该优化过程耗时短且可减少试验次数，是用于工艺优化的有效方法[5-6]。
本试验通过一系列单因素实验，研究微波功率、加热时间、料液比、乙醇浓度四个因素对七叶一枝花黄酮得率的影响。在此基础上利用，利用响应面试验设计进一步研究七叶一枝花总黄酮提取工艺条件，筛选出最佳组合，获取关键因素及关键因素之间的交互作用，以期能提高七叶一枝花总黄酮的得率，为实际生产中供理一定理论依据和技术支撑[7]。
1 材料与试验过程
1.1实验材料与仪器
七叶一枝花，于周口市同和堂药店购买；
芦丁标准品，国药集团化学制剂有限责任公司；
无水乙醇、氯化铝均为分析纯。
电子天平 梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司
FW高速万能粉碎机 郑州市亚荣仪器有限公司
电热恒温鼓风干燥箱 上海一恒科学仪器有限公司
SHB-Ⅲ循环水式真空泵 郑州市亚荣仪器有限公司
格兰仕微波炉 广东格兰仕有限公司；
紫外可见分光光度计 上海元析仪器有限公司。
另外，量筒、容量瓶、广口瓶、细口瓶、锥形瓶、试管等若干。以上实验仪器和材料均是由周口师范学院生命科学与农学学院实验室提供。
1.2实验方法
1.2.1 芦丁标准曲线的建立
称取0.01g芦丁标准品用30%乙醇溶液微波溶解并定容至100mL，从而得浓度为0.1mg/mL的芦丁标准液。分别取浓度为0.1mg/mL的芦丁标准液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于10mL容量瓶中，各加入5%NaNO2溶液1.0mL，摇匀静置6min,之后分别加入10%AL（NO3）3溶液1.0mL，摇匀静置6min，然后加5%NaOH溶液3mL，最后用30%乙醇稀释到刻度，摇匀静置15min，最后在紫外分光光度计下于510nm处测量其吸光度[8]。得到标准曲线（如图1）方程：
A=13.193C-0.0013 （R2=0.9985） ①
取1mL待测液稀释5倍，然后按1.2.1中步骤测定待测液中吸光度值.代入上式回归方程中，得待测液浓度，将浓度带入②式中，得黄酮得率。
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