亚锰对鲫鱼肾脏SOD、GST及CAT的影响(2)
肾脏对人体来说是很重要的器官，其生成尿液的基本功能得以去除生物体里的一些毒物、废物和代谢产物，与此同时水份和别的有用物质通过重吸收这个功能被留存下来，像葡萄糖、氨基酸、钾离子、蛋白质、碳酸氢钠、钠离子等，从而使电解质平衡、水及酸碱平衡得到文持的调节。机体新陈代谢能够正常进行以及机体稳定内环境的形成都依赖于这些功能。
锰具有重要的生理功能，不仅是在构成骨骼时很重要，而且对人体及动植物营养来说不可或缺。锰这一微量元素对心、脑血管来说非常有益，缺锰有可能引起动脉粥样硬化，能够加速细胞内脂肪的氧化作用，并能使脉粥样硬化病人身体内的脂质代谢得到改善，而且能够减少肾脏里累积的脂肪，有助于心、脑血管的保护[4-7]。锰被人称为“益寿元素”，其原因是因为它与人体健康的关系非常大，并且是人体内多种酶的组成成分。它对阿兹海默症的治疗很有效，因为它与脑部机能的正常与否有可能存在很大的关系。最近几年有科研成果让我么知道，锰存在于机体内的超氧化物歧化酶（SOD）内，且此酶可以抵抗衰老。
超氧化物歧化酶( SOD )在各类生物中普遍存在着，并且在机体内有着重要的作用，比如预防肿瘤和抗炎、抗衰老以及防御O2- 的毒性等等，相当于机体内O2- 的天然清除剂，可以使生物体内超氧自由基(O2一)歧化反应的发生得到催化，对机体细胞起保护作用，因此受到外界很多的关注[8]。GST使有毒化合物失去活性是它的一个最重要的能力。GST能对不同亲电分子进行亲核攻击通过催化谷胱甘肽中巯基基团，让外源性化合物与内源的还原谷胱甘肽 （GSH） 发生结合反应[9，10]。谷胱甘肽与外源化学物在生物转化阶段I中形成的某些生物活性中间产物结合后，可防止它们与细胞生物大分子重要成分发生共价结合，减少其对机体造成伤害的程度。CAT存在于所有已经知道的动物的各个组织的细胞器过氧化物体内，尤其是在肾脏中，可以催化过氧化氢分解成氧和水。过氧化氢酶( CAT ) 这一抗氧化酶非常重要, 它在鱼体中普遍的存在, 并且作为不错的分子生物标志物对污染物对水生生物毒性的影响进行评价[11]。本次实验研究鲫鱼的肾脏SOD、GST、CAT的活性在Mn的影响下有何变化为内容，分别以0.1 mol/LMn、0.5 mol/LMn、1 mol/LMn浓度的自来水饲养三组鲫鱼作为模型组，含0 mol/L Mn的为对照组，建立锰对鲫鱼肾脏SOD、GST、CAT的影响模型，分析不同浓度的锰对鲫鱼肾脏SOD、GST、CAT活性的影响。SOD、GST和CAT活力的变化分别显示了在锰的作用下鲫鱼肾脏细胞超氧化物歧化酶、谷胱甘肽S-转移酶和过氧化氢酶酶活力的变化机制以及锰对鲫鱼的毒理性作用。
1 材料与方法
1.1 供试材料
1.1.1实验动物
文沃市场购买24条大小相近的鲫鱼，分成四组，分别放置氧气泵，在实验室环境下饲养3天。
1.1.2实验试剂
(1)超氧化物歧化酶（SOD）活力测定所需试剂：
一号试剂：贮备液：10 ml x 1瓶（若有结晶热水溶解使用）；应用液的配制：使用时每瓶加蒸馏水稀释至100 ml，4℃下保存一年。
二号试剂：10 ml液体1瓶，4℃-10℃下保存一年。
三号试剂：10 ml液体1瓶，4℃-10℃下保存一年。
四号试剂：2支350 ul液体，4℃下保存；4号稀释液10 ml，1瓶，4℃保存6个月。用时按1:14稀释，需用多少配多少。配完后4℃保存。注：需使用一次性吸嘴。
五号试剂：1支粉剂，加70℃-80℃热双蒸水75 ml至溶解备用，加热过程中必须保证试剂为75ml，不够就用蒸馏水补，配好后4℃冷藏一年，需避光保存。
优尔号试剂：1支粉剂，使用时加蒸馏水75 ml溶解备用，配好后试剂避光4℃冷藏保存6个月。 配制显色剂：按照试剂五：冰乙酸：试剂优尔=3:2:3的体积比配显色剂，避光在4℃下冷藏3个月。注：必须分开配制试剂五、试剂优尔，不可先混合再配制，否则不显色。