甲基托布津降解菌的选育及鉴定
毕业论文关键词：甲基托布津;分离纯化;鉴定;微生物降解
Screening and identification of mildothane degrading bacterium
Abstract:A bacterial strain named ZY01 which could use mildothane as the only carbon source grothing and degrade the pesticide Thiophanate-Methyl was collected form the soil in herbary of agromedicine contamination in ZhouKou ,and it was identified as Pseudomonas and closely to Pseudomonas azelaica by analyes of morphology ,Physiological-Biochemical test and 16SrDNA. 7days, under the appropriate conditions ZY01 can degrade the moldothane(300mg/L) to 27.4%.
Keywords: Mildothane；Separation and Purification； Evaluation ； Micro-biological Degradation
目 录
摘要 1
关键词 1
引言 1
1.材料与方法 3
1.1 主要试验试剂和仪器 3
1.2 土壤样本采集 4
1.3 培养基配制 4
1.4菌种分离与纯化 4
1.5甲基托布津标准曲线的绘制 5
1.6菌株降解率的测定 5
1.7菌株最适生长温度测定 6
1.8菌株生长情况测定 6
1.9菌株的鉴定 6
1.9.1形态学鉴定 6
1.9.2生理生化试验鉴定 6
1.9.3菌株16SrDNA鉴定 6
2.结果与分析 6
2.1甲基托布津标准曲线图 6
2.2菌株降解率测定结果分析 7
2.3菌株最适生长温度结果分析 7
2.4菌株生长情况分析 9
2.5菌株形态学鉴定结果 9
2.6菌株生理生化鉴定结果 10
2.7 16SrDNA鉴定结果 10
3.结论与讨论 12
参考文献 13
致 谢 16
甲基托布津降解菌的选育及鉴定引言
农药作为广泛使用且和人类发展有关的化学物，降解其在环境中的污染主要在于生物和非生物两大层面，大量研究表明微生物在农药降解中占主导地位[1]。降解速度因农药的不同而存在较大差异，部分农药像DDT等很难降解，而且在食物链中聚积[2-3]；部分农药像有机磷类等容易降解[4]；此外，一些农药像克百威很容易降解，但不利于防治病虫害[5]。
20世纪40年代，有关于生物降解的研究开始进行，从微生物对有机物的破坏或矿化为生物降解的最初认识 [6]，到部分微生物降解菌制剂的应用，人们对生物降解认知的愈加透彻 [7]。
经过对微生物降解农药的不懈研究，至今已取得很大进展，农药降解机理透彻的研究，降解菌降解能力的强化 [8]，更多不同种的农药降解菌被发现等都是有力的证明[9]，
我国现已有部分农药降解菌制剂研制成功，其中一些通过了专家的鉴定，而且有些药剂已投入到生产应用中[10]，如南京农业大学李顺鹏教授研制的“佰绿得”；中国农科院的范云优尔院士等克隆的有机磷降解酶基因利用“毕赤酵母”高效表达等[11]。
甲基硫菌灵(Thiophanate-Methyl)商品名为甲基托布津，纯品是无色结晶，熔点172℃，基本不溶于水，可溶于丙酮、乙醇、氯仿等有机溶剂，对酸碱稳定[12]。70%、50%为淡褐色可湿性粉末，40%胶悬剂，10%乳剂。甲基硫菌灵是一种广谱、内吸性杀虫剂。对赤霉病、水稻稻瘟病、油菜菌核病、蔬菜白粉病、番茄叶霉病、棉花苗期病害、柑橘储藏期病害等有很好的防治效果[13]。