微囊藻水华是淡水中最常见的蓝藻水华之一， MCs污染现已成为世界性的环境污染问题。MCLR性质稳定，易溶于水（溶解度大于1g/L）、酮、甲醇等溶剂中，不易存在于沉淀物和悬浮颗粒物中。可在15～30℃水温的富营养化水体中长时间存在，在离子水中超过27天毒素依旧很稳定[5]。然而在色素存在的情况下，可以使MCYST的活性降低从而使其迅速降解[6]。有毒的水体富营养化能够导致水体内部的动物和野生植物的死亡，并对人类的健康产生威胁；与此同时，微囊藻毒素能使浮游动物和鱼类中毒，并能在鱼类和水生动物体内富集[7]；研究表明，微囊藻毒素（MCs）的致毒机理主要是通过其与蛋白磷酸酶结合，抑制酶的活性，从而导致细胞蛋白磷酸酸化度增高，引发哺乳动物肝细胞微丝分裂、破裂和出血，肝充血肿大，失血休克死亡等病症[8]。MCs是具有多器官毒性、遗传性和致癌性的藻毒素类物质，其中主要以肝脏为靶器官，破坏细胞内的蛋白磷酸化平衡，改变多种酶的活性，引起肝脏病变，造成一系列生理紊乱[9]。自从1878 年Francis第一次发现泡沫节球藻(Nodularia spumigena)水华能够引起家畜、禽类中毒并能造成死亡以来，有关藻类水华引起的家畜、家禽、鱼类、野生动物及人类宠物中毒死亡的报道便出现很多[10]，微囊藻毒素对动物的毒害程度主要与水华密度、水体毒素含量有关，也与动物种类和大小有关。水华爆发的高发期之一的春末夏初，恰巧正是蛙等两栖类动物抱对产卵的重要时节，如果微囊藻毒素确实能够诱导两栖动物雄性生殖毒性，那么必然会对两栖动物的种群退化产生重要影响。

本研究以微囊藻毒素MCLR为污染因子，以模式两栖类动物黑斑蛙为研究对象，探讨在体内低剂量（1μg/L）暴露下MCLR对两栖动物黑斑蛙的雄性生殖毒效应，同时明确MCLR对黑斑蛙雄性生殖毒性是否存在时间-效应关系，从而阐明广泛存在于水生生态系统中的藻毒素污染与两栖动物种群退化的关系，为保护两栖动物和生态毒理学的研究奠定理论基础。

1.材料和方法

1.1 实验动物及处理

黑斑蛙（健康成年）捕自杭州市郊，均长为(74.5±4.3) mm，均重为(36.6±9.8) g。在室内盛有2.5cm左右嚗气自来水(嚗气3d以上)的玻璃缸(30cm×30cm×60cm)中暂养7d，玻璃水缸在实验前用10%的稀硝酸浸泡，之后挑选健壮、规格统一的黑斑蛙进行实验。实验中的对照组和染毒组（每组20只）均为随机分配。染毒组暴露于2L的MCLR溶液中，对照组暴露于2L的清洁水溶液中。每天更换（静态置换法）溶液1次。进行驯养和实验时黑斑蛙均没有出现死亡现象。染毒结束后，用双毁髓法处死黑斑蛙，取精巢组织和血液待测。