2.3.8 SF9昆虫细胞 13

3 结果与讨论 14

结果 14

一 Marker（ladder） 14

二 目的片段扩增得到的PCR产物鉴定 14

三 重组质粒的酶切鉴定结果 15

四 样品1二次实验结果鉴定 16

讨论 17

4致谢 19

5参考文献 20

1  绪论

    在细胞中，有许许多多的化学物质可以相互之间传递信息，比如蛋白质，氨基酸，多肽等，还有一种重要的信号传导分子就是NO分子。我们将这种可以在细胞之间传导信息的分子叫做配体。配体为了能够完成向靶细胞传递信息的过程，它们就必须与特定的受体相互连接。受体，蛋白质的一种，它们位于靶细胞的特定位置中。他们与对应的配体相互结合，并启动靶细胞中的特定信号。根据靶细胞中不同的定位，受体可以被分为两种类型，一种是细胞表面受体，另一种是细胞内受体，前者受体又包括了G蛋白偶联受体，离子通道受体和醇联受体这三类。[1]G蛋白偶联受体普遍存在于生物体内，它是人类体内数量最大的细胞表面受体一族。由于细胞膜上这些聪明的受体，G蛋白偶联受体的存在，让我们发现了人体内的五彩缤纷。 

　　聚合酶链式反应（PCR）技术用于分子生物学中，可以在几个数量级范围内扩增一个单拷贝或者多拷贝的DNA片段，同时生成数千到数百万特定的DNA序列。这项技术对于扩增一个较为集中的DNA片段是既方便又廉价的，它在遗传疾病的诊断和监测，识别犯罪（在法医学领域），以及研究目标函数段等方面有着重要作用。在1983年由凯利·穆利斯发展研究后，PCR现在十分普遍，它也是医学和生物研究实验室中为操作各种不同应用程序而被使用的一项不可或缺的技术[2]。其中一些程序包括DNA克隆测序，DNA发展史或基因功能分析，遗传性疾病诊断，基因指纹的识别（用于法医科学和DNA亲自鉴定测试）以及传染病的监测和诊断。1993年，凯利·穆利斯和迈克尔 史密斯在PCR技术工作研究上被授予了诺贝尔化学奖。

    琼脂糖凝胶电泳法应用于生物化学，分子生物学，遗传学，临床化学，用来分离在一个叫做ofagarose矩阵里混合种群的DNA或蛋白质。蛋白质可以在电荷分离度或者大小（等电点聚集琼脂糖电泳本质上是大小独立的），DNA和RNA片段长度来进行分离。生物分子通过施加一个电场使带电分子从琼脂糖矩阵中移动来进行分离，另外，生物分子还通过在琼脂糖凝胶内形成的大小来进行分离。[3]琼脂糖凝胶很容易制备，尤其适合最常出现在实验里的分离粒度范围源]自\优尔|文}论(文]网[www.youerw.com。分离出的DNA可能被染色，最常见的是在紫外线的照射下。DNA片段可以相对轻松地从凝胶中提取出来。多数琼脂糖凝胶溶解在0.7 - 2%范围内的电泳缓冲液中。

1.1  研究意义和目的

1.1.1 意义                                    

  聚合酶链式反应（PCR）技术用于分子生物学中，可以在几个数量级范围内扩增一个单拷贝或者多拷贝的DNA片段，同时生成数千到数百万特定的DNA序列。这项技术对于扩增一个较为集中的DNA片段是既方便又廉价的，它在遗传疾病的诊断和监测，识别犯罪（在法医学领域），以及研究目标函数段等方面有着重要作用[4]。