含有非脯氨酸的DKP的合成+文献综述(4)
图1.2.2.1 固相合成环二肽的基本步骤
总之，环二肽的合成，既可以用液相的方法，也可用固相的合成方法，或者两种方法结合。在固相合成方法中，线性序列在聚合物载体上合成，然后从树脂上解离下来，在溶液中进行环化反应，最后脱除侧链保护基。在液相或固相反应中，成功的肽环化反应主要取决于线性目标序列在构象上的倾向性，其次还有溶剂、碱的类型、反应浓度及温度的影响等。
1.3 本课题研究的内容及意义
本课题以L-羟脯氨酸以及其它的氨基酸为原料，经甲酯化保护羧基，苄氧甲酰基保护氨基，在0℃条件下，用DCC脱水缩合，形成直链二肽，过滤除去白色的二己基脲。滤液用适当的洗脱剂，采用极性梯度法，柱层分析得到较纯的中间产物，再经Pd/C在室温下催化氢解脱掉苄氧甲酰基和甲醇，关环得到目标产物，再次分离纯化。最后经过质谱和核磁共振来鉴定其结构，证明所得的是目标产物。
此外，本课题中研究了三条非脯氨酸的环二肽的合成路线，并对其中的反应条件进行优化如合成路线的的选择，反应的温度、浓度以及时间，保护基的选择及其与缩合方法的搭配，纯化条件的选择等等。然后，采用最合适的的线路和最优的反应条件，得到目标产物。
本课题研究的意义: 环二肽的分子结构和活性具有稳定性、独特性和新颖性的优点，因此在医药、食品及天然产物开发研究等众多的领域中具有广阔的应用前景。如因海洋微生物生活在低温、高压、寡营养、高盐的环境中，能产生结构新颖多样，活性独特的DKP类的天然产物。其功能不局限于抗菌、细胞毒活性等方面，在群体感应调控机制中也充当着信号分子的重要角色，已成为化学生态学的研究热点。此外，它可作为活性先导化合物，在寻找蛋白作用位点，药物靶点等方面扮演重要的角色。但是其研究仍处于初级阶段，目前还有以下问题亟待解决：1) DKPs分子的生物合成途径；2）DKPs的吸收及代谢机制；3）DKPs参与群体感应系统调控的作用机制不明确。
1.4 理论基础
1.4.1 环二肽合成反应的基本过程
环肽的合成包括四个步骤：
第一，需要制备部分保护的氨基酸，使得氨基酸的两性离子结构不再存在；
第二，为形成肽键的两部反应，N-保护氨基酸的羧基必须先活化为活性中间体，随后形成肽键。这一耦合反应即可作为一步反应进行，也可作为两个连续反应进行。
第三，对保护基进行选择性脱除或全脱除。
第四，链状肽的成环反应。
1.4.2 氨基酸的保护策略
环二肽的合成策略包括最佳的保护基组合和最合适的缩合方法，以使肽键的形成步骤是最优化的，其中较为本质的是一些功能性基团的保护。同时，在合成的过程中要注意保护基的脱除，尤其是临时性与半永久性保护基的区别。在本课题中氨基酸的氨基采用了Cbz和Boc的保护策略。
a)苄氧羰基 这是目前较常使用的氨基的保护基之一，它的缩写为Cbz。引入Cbz基的方法，是在肖登-鲍曼条件下，氨基酸与氯甲酸苄酯反应，在氢氧化钠、碳酸氢钠或氧化镁存在下，在含水的有机溶剂中激烈搅拌。Cbz的脱除可在HBr/HOAc、液态HBr、沸腾的TFA、HBr/TFA、液体HF等酸解条件下完成，或利用不同的催化剂在多种反应条件下进行催化氢解。如Pd/C或Pd/BaSO4作为催化氢化的催化剂，在有机溶剂或含水的有机溶剂中均能顺利进行。
b)叔丁氧羰基 它是目前肽合成中最重要的氨基保护基之一，它的缩写是Boc。它可与大多数的缩合方法匹配使用，它能在温和的酸解条件下脱除，对催化氢化、碱性水解、钠/液氨还原条件稳定。氯化氢的乙酸、二氧优尔环、醚或乙酸乙酯溶液是重要的脱保护试剂。在零摄氏度左右，用无水三氟乙酸能平稳地脱除Boc。