外植体（叶、愈伤组织等）通过诱导培养分化出胚状体，再经球形期、心形期、鱼雷期和子夜期发育成再生植株。

（4）原球茎

外植体经原球茎途径分化形成植株。

（5）无菌短枝扦插

用已经发育或除去顶芽后萌发的腋芽，连同短枝进行表面消毒，在无菌条件下培养，使其生长并诱导生根，为此在短时间内即可获得植株，尤其对珍贵的优良树种或花卉品种是简单有效的方法。

就木本植物而言，植株再生途径可分为两类[14]：一是先从植物的外植体上诱导出合适的愈伤组织，再将愈伤组织转接到相应的培养基上诱导出不定根或不定芽原基。这属于间接器官发生过程；二是不采用诱导愈伤组织的方法，直接从原始外植物植体上诱导产生不定芽或不定根。这属于直接器官发生。

1.1.5  植物组织培养的步骤[15]

（1）培养材料的采集    

植物组织培养所用的材料非常广泛，可采取根、茎、叶、花、芽和种子的子叶等，有时也使用花粉粒或花药，其中根尖不易灭菌，一般很少采用。

（2）培养材料的消毒

    ①先将材料用流水冲洗干净，最后一遍用蒸馏水冲洗，再用无菌纱布或吸水纸将材料上的水分吸干；

    ②在无菌坏境中将材料放入75％洒精中浸泡30s左右；

    ③将材料移入漂白粉的饱和液或0.01％升汞中浸泡消毒4min到10min；

    ④将材料取出后用无菌水冲洗4到5次。 

（3）外植体的制备 

将已消毒的植物材料，用无菌刀、剪、镊等工具，在无菌的环境下，剥去芽的鳞片、嫩枝的外皮和种皮胚乳等，叶片则不需剥皮。然后切成大小合适的小片作为外植体。试验操作中必须保持无菌的环境条件。文献综述

（4）接种和培养 

    ①接种：在无菌坏境下，用无菌镊子将处理好的外植体接在相应的培养基上，每瓶接种数视外植体大小而定。

②封口：接种后，迅速将瓶口用无菌封口膜封住。

③温度：接种后的培养基大多应保持在25℃到27℃左右。

④增殖：将初代培养过的植物外植体进行分株或切段，再转接入继代培养基进行诱导增殖，由此来扩大繁殖系数，这是组培的关键阶段之一。增殖一次后可根据试验的具体需要进行再增殖。

⑤根的诱导：外植体经继代培养后一般会形成不带根的不定芽和侧芽等植物器官，这时候必须先将这些植物器官分株，然后转到生根培养基上进行诱导生根。（5）组培苗的练苗移栽 

试管苗从无菌和光、温、湿稳定的环境进入自然环境，必须进行炼苗。通常在移植前，首先要打开培养容器，在室内承受3天的自然光照，然后将苗取出，用自来水冲洗根系上的营养基，再移栽到基质中。为了防止植株发生烂苗现象，所用的基湿度不宜太大。

1.1.6  植物组织培养的意义及应用

20世纪60年代以后，生物技术在农业、食品工业、能源、环保以及医药等各个领域都显示出极大的生产应用潜力，作为其重要手段与途径的植物组织培养也日益受到重视和探索发展，成为现代农业及多种行业重要的技术手段，开始在生产上得到广泛应用，并且逐渐朝着产业化方向发展[16]。植物组织培养技术除了运用于植物的脱毒和快速繁殖外，还可用于[17]：

（1）育种研究

在包括单倍体育种、胚培养、单细胞培养突变体的选择与应用、体细胞杂交育种、转基因育种等育种研究中，植物组织培养技术得到了广泛的应用，并且取得了重要的成果。植物组织培养技术已经成为改良作物、获得杂种植株、筛选突变体培养成植株用作遗传学研究、进行体细胞杂交育种、建立植物的遗传再生体系的重要的途径和方法。