摘要本论文主要通过直接的电化学方法来测定并讨论研究扁桃酸脱氢酶的活性。直接的电化学方法有别于荧光法、分光光度法、旋光法等常用的酶活性检测方法，主要通过一系列反应将扁桃酸脱氢酶固定在金电极表面，然后把电极置于PBS/铁氰化钾电解液中，并在-0.4-0.6V范围内扫描循环伏安图，结果会出现一对峰形良好、几乎对称的还原氧化峰，表明该修饰的电极上有电子的传递。当PH值、扫描速度以及酶浓度发生改变时，氧化还原峰电流也将随之改变，峰电流越大，酶活性越大，通过峰电流的变化来探究酶的活性，更重要的是研究并理解了反应进程。63955

毕业论文关键词  酶活性  直接电化学 金电极  扁桃酸脱氢酶

毕业设计说明书（论文）外文摘要

Title  Determination and Studies in the activities of Mandelate Dehydrogenase using Direct Electrochemistry

Abstract This thesis mainly through direct electrochemical method to determine and discuss research mandelic acid dehydrogenase activity. Direct electrochemical method is different from fluorescence spectrometry, spectrophotometry, polarimetry activity of other commonly used detection methods, mainly through a series of reactions to fix mandelate dehydrogenase on the gold electrode surface, and then place the electrodes on PBS / iron potassium cyanide electrolyte, and scan cyclic voltammogram in the range-0.4-0.6V , the result will appear two shape well, nearly symmetrical redox peaks, indicating that there is electron tranfering on the modified electrodes . When the PH value, the scanning speed, and the enzyme concentration is changed, the redox peak current will also change, the peak current increases, the greater the activity is.So through changes in the peak current to explore the enzyme activity, studying and understanding the progress of the reaction is of more importance.

Keywords enzyme activity  direct electrochemistry  gold electrode  mandelate dehydrogenase

1 绪论 2

1.1 酶的简介 2

1.2 酶的发现历史 2

1.3 酶的特性 3

1.4 酶活性的测定 4

1.5 本实验研究方向及意义 5

2 材料与方法 6

2.1 主要仪器设备 6

2.2 主要原料试剂 6

2.3 实验方法 7

3 条件选择 11

3.1 不同体系 11

3.2 PH值的影响 11

3.3 扫描速度的影响 14

3.4 铁氰化钾的影响 17

结  论 19

致 谢 20

参考文献 21

1 绪论

1.1 酶的简介

酶，又称为酵素，是一类具有生物催化特性的高分子物质，虽然大多数酶为蛋白质分子，但是也有两种特殊的，它们分别是DNA酶和RNA酶。[1,2]在催化反应体系下，底物是反应物分子，酶催化底物转化为另一种分子。在生物体内，几乎所有的新陈代谢都有着酶的参与，以此来提高效率，通常酶催化反应速率可提高至几十万倍，甚至上百万倍。酶催化生物反应的本质是降低反应所需要的活化能，自身的量却不随着反应的进行而改变，当然也不会影响反应的化学平衡。酶不仅具有正催化作用，还具有负催化作用；不仅可以增加反应速率，还可以降低反应速率。目前已知的可以被酶可以催化的反应约有4000种。[3]