摘要： 本论文旨在研究不同pH对里氏木霉产纤维素酶的影响，从而找到里氏木霉产纤维素酶的最佳pH值，为纤维素酶的产业化生产提高理论依据。论文设计分别在pH3；3.5；4；4.5；5；5.5；6的情况下发酵培养里氏木霉并测定其纤维素酶酶活随时间的变化。实验表明不同的pH对里氏木霉产纤维素酶影响较大；不同pH下3%草和3%微晶纤维素的2组培养瓶中，酶活增长趋势基本相同，但同一天同组不同实验瓶进行比较pH5的实验瓶基本连续7天较其他实验瓶酶活都是最高的，第6天酶活最大，3%草为诱导剂和3%微晶纤维素为诱导剂时其酶活分别达到 0.45U和0.27U。因此，在以后的里氏木霉产纤维素酶实验和或工业生产中可以采取pH5进行培养。66468

毕业论文关键词: 里氏木霉，纤维素酶，pH,酶活

Abstract: The aim of this paper to study the effect of pH on cellulase activity from Trichoderma reesei, providing the theoretical basis for choosing the optimum pH for cellulase production from T. reesei. It is designed to measure cellulase activity over time when grow T. reesei at pH3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6. The results shows that there is a great effect of pH on the cellulase production from T. reesei; with 3% grass and 3% microcrystalline cellulose, the growth trend of the cellulase activity is basically the same when grown on different pH; but on the same day, the cellulase activity from pH5 is the highest among other pHs for 7 days, with cellulase activity reaching the highest at Day 6, reaching 0.45U and 0.27U for 3% grass is induced to agent and 3% microcrystalline cellulose, respectively. Thus, pH5 should be used to culture T. reesei in the future experiments or industrial production of the cellulase production.

Keywords：Trichoderma reesei，cellulase, pH, enzyme activity

目录

1 前言 6

2里氏木霉及其纤维素酶6

2.1纤维素酶.....6

2.1.1纤维素酶的作用机制与制备..6

2.2 里氏木霉7

3 里氏木霉产纤维素酶的应用.7

3.1 果蔬业....7

3.2 酿酒业....7

3.3可降解塑料业.....7

4实验材料和方法 7

4.1实验菌种和药品 7

4.2培养基 8

4.2.1 玉米将种子培养基.....8

4.2.2基本培养基 8

4.2.3 PDA培养基 8

4.3试剂 9

4.3.1 DNS试剂 9

4.3.2柠檬酸缓冲液 9

4.4实验仪器 9

4.5菌种制备 10

4.6 设置产霉培养基pH梯度 10

4.7绘制葡萄糖标准曲线 10

4.8酶活计算方法 11

5实验结果与分析 11

5.1微晶纤维素3%的培养基中不同pH对产纤维素酶的影响 12

5.2草3%的培养基中不同pH对产纤维素酶的影响 13

5.3分析与讨论 14

结论 15

参考文献 16

致  谢...17

1 前言：

能源是人们赖以生存和持续发展的重要物质基础。常规化石资源的不可再生和其利用时对环境造成严重污染,是人类面临着日趋严重的能源危机和环境恶化.合理开发利用生物质无论在能源安全战略上/经济上,还是资源和环境保护方面都具有重要意义[1]。21世纪能源紧缺问题日益凸显，引发国际社会的广泛关注。随着能源消费总量的迅速上升，石油和煤炭资源日渐枯竭，人们将目光投向了可再生性资源—纤维素，以期缓解环境和能源问题，这已成为各国学者关注的重要领域[2]。全世界植物每年生成的干物质高达150*109t，植物纤维素是其中主要物质成分，总量高达85x109t，是地球上分布最广、蕴藏量最丰富的物质之一，也是最廉价的可再生资源。自然界中植物纤维素主要是被微生物降解成有机碳源利用，纤维素也因此成为生物圈中最大的物质流之一[3]。为了经济的可持续发展和人类的生存，我们必须寻求新兴能源来代替不可再生性能源。秸秆等木质纤维素转化为生物乙醇是解决这一问题的有效途径，可以缓解我国石油资源短缺的危机。改进纤维素没生产工艺，提高纤维素酶生产效率，降低纤维素酶生产成本是纤维素乙醇生产技术的关键之一[6]。本实验主要采用单素实验设定不同的pH梯度对里氏木霉产纤维素酶的发酵条件进行优化，以找到里氏木霉产纤维素酶的最适pH，提高里氏木霉产纤维素酶的产量，并且为进一步提高里氏木霉产纤维素酶能力提供一定的实验和理论基础。