本实验以市场购买的鲫鱼为实验对象,分别研究了不同饥饿时间下鲫鱼的肌肉中的水分、脂肪、糖类、蛋白质含量,旨在为生产鲫鱼的饲料配置提供理论参考。
2 材料来源及实验设计文献综述
2.1鲫鱼的来源
实验鲫鱼2015年3月购于淮海路菜场,平均体重150.2±5.3g。
2.2实验设计
将实验鲫鱼取至实验室后暂养10d以适应实验室环境,10d以后开始实验。实验分为二组,分别为饥饿0d、14d,每组三个重复。实验期间禁止投饵,每天9:00捞出死鱼,并移走粪便,水族箱每天换水1/5,配以24小时充气,实验期间水温保持在25±1℃。实验开始时取0d组鲫鱼,用吸水纸将鲫鱼体表的水分吸干,称取体重,人工去鳞后取背部肌肉,称其重量,并且记录数据,将称取的肌肉放入密封袋中,标好编号,置于冷藏柜中备用,另外一组到取样时间取样,方法同上[3-4]。
2.3 样品测定
2.3.1含水量测定
直接干燥法,将每组鲫鱼肌肉(湿样)置于60℃干燥恒温箱中烘至恒重之后取出,计算含水量[3]。将干燥后的肌肉密封在对应编号的小密封袋中备用。
2.3.2总脂的测定
总脂的抽提采用Folch法,抽提液为氯仿和甲醇溶液(V:V=2:1),然后通过过滤去除蛋白质等滤渣,添加MgCl2溶液除去甲醇,脂类混合液在真空条件下蒸发除氯仿溶剂,试管中最后便得到脂类[5]。
2.3.3 总糖的测定
采用苯酚-硫酸法测定总糖。苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚生成橙黄色化合物,再以比色法测定[4]。首先制作出葡萄糖标准曲线,得回归方程为y=0.0501x-0.0034,R2=0.997。在“制作标准曲线”项下用UV757CRT分光光度计测定样品液的吸光度,对照标准曲线换算成糖的质量并计算含糖量。
2.3.4蛋白质的测定来~自^优尔论+文.网www.youerw.com/
鲫鱼肌肉中粗蛋白质的测定采用微量凯氏定氮法,鲫鱼肌肉(干样)与硫酸和催化剂(硫酸钾与硫酸铜的质量比为9:1)一同加热消化,使蛋白质分解,待消化液变成淡蓝色液体时即告消化完成。待消化液冷却至室温后,将消化液通过全自动凯氏定氮仪测得蛋白质含量[6] 。
3.计算与数据分析
用EXCEL记录数据,SPSSl1.0软件包对实验数据进行统计分析,所有数据均采用平均值±标准差(means±SD)表示,采用One-Way ANOVA(Duncan)对数据进行分析,取P<0.05为差异显著水平。