摘要：纤维素具有水不溶性的高结晶构造，是一种葡萄糖的高聚物，具有难以被降解的特点，因此它的利用率很低。本实验利用纤维素降解菌的特性：可以把纤维素降解为还原糖。将已筛选出的六株纤维素降解菌进行纯培养，接种以纤维素为唯一碳源的液体培养基进行发酵，通过测试液体培养基中还原糖的量来比较不同菌株降解纤维素的能力，然后进行酶活力测定，筛选出降解纤维素能力强，酶活力高的菌株。再使用超声波进行菌体破碎，测定胞内酶活力。66802

毕业论文关键词：纤维素降解菌，筛选，酶活力

Abstract: Cellulose having a water-insoluble high crystallinity structure, which is a polymer of glucose and is hard to be degradated. So the rate of utilization is low. In this study, to consider with the characteristic of cellulose-degrading microbes: they can degrade cellulose into sugar. Put the six kinds of screened cellulose-degrading bacteria into pure culture, then inoculating liquid medium with cellulose as the sole carbon source for fermentation, measuring the amount of sugar in the liquid medium to compare their ability of degradation of cellulose, determining enzyme activity, finding out which strain with higher degradation ability and enzyme activity. Then use ultrasonic to disrupte cells and measure the intracellular enzyme activity.

Keywords：Cellulose-degrading microbes, screening, enzyme activity

目 录

1　前言 4

1.1　纤维素及其价值 4

1.2　纤维素酶及其应用 4

1.3　实验目的 5

2　实验材料 6

2.1　菌株 6

2.2　培养基及培养条件 6

2.3　主要的实验仪器与设备 6

3　实验方法 6

3.1　菌种的纯培养 6

3.2　液体摇瓶发酵 6

3.3　DNS法测还原糖 7

3.3.1　纤维素酶测定原理 7

3.3.2　3,5-二硝基水杨酸显色剂(DNS显色剂)的制备 7

3.3.3　pH 4.6 10 g/L羧甲基纤维素钠缓冲液的配制 7

3.3.4　葡萄糖标准曲线的绘制 7

3.3.5　菌液酶活力测定 8

3.4　比较菌体和菌液中还原糖含量 8

3.4.1　菌体的获得与裂解 8

结果与分析 9

参考文献 12

致　谢 14

1　前言

1.1　纤维素及其价值

纤维素在自然界中分布最广，是植物体含量最多的一种多糖。无论一年生或多年生植物，尤其是在各种木材中都含大量的纤维素。自然界中，植物体内存在的纤维素形式的碳约有50％。棉花、木材、麻、麦秆、稻草、甘蔗渣等，都含有大量的纤维素。其中棉花中的纤维素含量最高，达到90%以上[1]。木材中的纤维素通常与半纤维素和木质素共同存在。纤维素是一种复杂的多糖，含有8000至10000个葡萄糖残基通过β-1,4-糖苷键连接而成[2]。纤维素在水中有高度的不溶解性，同时也不溶于稀酸、稀碱和有机溶剂，主要的生物学功能是构成植物体的支持组织，维持一定的形态。