2.2.1 试验背景 9

2.2.2 实验原理 9

2.2.3 仪器与材料 9

2.2.4 试验方法 10

2.2.5 讨论 15

2.2 离线高效液相色谱-DPPH清除活性-电喷雾质谱技术对枳椇子中抗氧化活性成分的快速筛选 15

2.3.1 实验背景 15

2.3.2 实验原理 15

2.3.3 实验内容 15

2.3.4 结果与分析 16

3 结果与讨论 19

结论 20

参考文献 21

致谢 23

1 引言

    近30年来，国内外学者对枳椇子的化学成分进行了大量的研究，发现其含有不饱和脂肪酸类、苯丙素类、黄酮及其苷类、三萜皂苷类、生物碱类、醌类等成分。随着科技水平的发展，科研工作者发现枳椇子具有解酒保肝【1-3】、抗肿瘤抗癌【4-6】、抗菌抗炎【7】等药理活性。为了进一步摸清枳椇子的生物活性基础及扩大其药理作用。本文利用DPPH法对枳椇子的生物活性成分进行了系统的研究，为枳椇子的深入研究提供指导意义，从而为枳椇子的综合开发奠定基础。论文网

人的衰老和许多疾病都与自由基密切相关，近年来抗氧化剂发展迅速，它不但可以调整机体的生理平衡，还可预防或抑制疾病的发生。人们在关注由自由基引起的病症的同时，对自由基及其清除剂的研究成为热点。虽然科学家通过合成的手段已得到一些活性很强的抗氧化剂，但合成过程繁琐，代价高，且使用常会带来一些副作用。因此，从天然药物中探索天然抗氧化剂越来越受到人们的关注[8-9]。1,1-二苯基-2-苦基苯肼自由基（C18H12N5O6，M=394.33）是一种合成的稳定的自由基，其在517nm处有最大紫外吸收值，加入抗氧化剂（样品），混合均匀后通过测定其在517nm处吸光度值，即可看出抗氧化剂对DPPH的清除能力[10]。主要表现为DPPH和抗氧化剂混合溶液颜色由深紫色逐渐消褪，其褪色程度与其所接受的抗氧化剂电子数（自由基清除活性）呈定量关系。因此，通过在517nm测定清除DPPH自由基引起的溶液的吸光度值来变化判断样品的抗氧化能力。评价自由基清除剂效果常用指标是IC50值，即半数清除率浓度（自由基清除率为 50% 时自由基清除剂的浓度），IC50值越小，表示自由基清除效果越好[11-12]。

2 实验部分

2.1 枳椇子抗氧化活性部位的筛选

2.1.1 实验背景

现代研究发现枳椇子中含有大量的黄酮及酚类成分，其具有保肝解酒、抗氧化、降压的功效[13-15]。文献报道植物中所特有的黄酮类成分具有抗脂质和保护肝损伤的作用[16-17]，现代医学研究证明：黄酮及酚类成分具有增加人脑血管中的血流量,改善血压,降低血糖，抗脂质过氧化,清除机体自由基,增强人体的免疫力、解酒护肝等功能。本内容以维生素C和维生素E为对照品，旨在考察枳椇子醇提物不同极性部位清除自由基的能力，为指导进一步的提取分离及活性检测打下基础。

2.1.2 材料与方法

2.1.2.1 药材来源