酶促反应的快慢决定了土壤营养物质的转化速度。在土壤物质和能量的转化中,氧化还原酶类占有重要地位[5]。它能参与土壤腐殖质组分的合成以及土壤的发生和形成过程。因此对土壤氧化还原酶类的研究将有助于对土壤肥力实质等问题的了解。土壤中分布最广的氧化还原酶之—就是过氧化氢酶[6]。
过氧化氢主要存在于生物体和土壤中,它是由有机物的生物化学氧化反应和生物呼吸过程所产生的结果,这些过氧化氢对土壤和生物体等有很大的害处[7]。然而,在土壤和生物体中又存在着大量的过氧化氢酶,它能促进过氧化氢反应分解为水和氧气,从而解除了过氧化氢的毒害作用[8]。因此对土壤中过氧化氢酶的研究就显得至关重要。
过氧化氢酶是生物呼吸和代谢的过程,而且也是土壤动植物根系分泌和残体分解中的重要的酶类,在生物体中,过氧化氢酶的作用就是破坏生物体中有毒的过氧化氢[9]。因此无论是研究土壤、植物,还是动物过氧化氢酶都具有重要意义。测定土壤过氧化氢酶活性主要是基于测定过氧化氢与酶作用后释放出的氧和测定剩余的过氧化氢两方面[10]。文献综述
2 材料与方法
2.1 采集区概况
淮安市属黄淮和江淮冲积平原。土壤主要为水稻土类、潮土类、砂礓黑土类、黄棕壤土类、基性岩土类、石灰岩土类。有机质含量低,一般不足0.2%,PH值7-8之间。
2.2 土样采集
实验样品是在淮阴师范学院理工楼的东面的一片田里采集的,主要采集了6种作物,12个样品,分别为玉米表面,玉米根部,油菜表面,油菜根部,蚕豆表面,蚕豆根部,菠菜表面,菠菜根部,大蒜表面,大蒜根部和小麦表面,小麦根部。土壤采集完成后,挑出残根等杂物,先放在实验室烘干,再用1mm筛筛选,装在锥形瓶内放在实验室保存。
3 土壤测定
3.1 土壤水分的测定
取12个干燥的三角瓶,贴上标签纸,写上对应的样品名称,先称取干燥瓶的重量,再称取湿土和瓶的重量,放在50℃的烘箱里烘干,隔一段时间取出继续称重,直至干土和瓶的重量不再变化,最后计算出土壤的含水量。
含水量=[M(湿土+瓶)-M(干土+瓶)]/M(湿土)
3.2 土壤PH的测定
3.2.1 原理
用水或中性盐可以提取出土壤中水溶性或交换性氢离子。用PH玻璃电极做指示电极,甘汞电极为参比电极,测定浸出液的电位差。因参比电极电位是固定的,因而电位差的大小决定于试液中的氢离子浓度。用PH计直接读出PH值。来!自~优尔论-文|网www.youerw.com
3.2.2 主要仪器
PH酸度计、小烧杯、搅拌器。
3.2.3 试剂配制
(1)pH4.01标准缓冲液:称取经105℃烘干的苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4)10.21g,用蒸馏水溶解后稀释至1000ml。
(2)pH6.87标准缓冲液:称取在45℃烘干的磷酸二氢钾(KH2PO4)3.39g和无水磷酸氢二钠(Na2HPO4)3.53g,溶解在蒸馏水中,定容至1000ml。
(3)pH9.18标准缓冲液:称3.80硼砂(Na2B4O7*10H2O)溶于蒸馏水中,定容至1000ml。此溶液的pH值容易变化,应注意保存。