茉莉酸甲酯(MeJA)是环戊酮衍生物之一,茉莉酸甲酯作为植物体内一类信号物质,传 递各种信息,来启动植物基因的表达,在植物的生长发育、应激反应和次生代谢过程中发 挥类似激素的作用, 对植物的生长发育和防御系统都具有一定影响。由于茉莉酸甲酯的使 用量极微,而且在植物中天然存在,无毒无污染,因此在鲜果蔬菜中应用的研究是这几年 的热点。目前的研究表明,外源茉莉酸甲酯处理可有效抑制一些采后果蔬真菌性病害的发 生[1]。茉莉酸甲酯对参与氧化猝发和脂质过氧化的部分酶及代谢物都会产生不同程度的影 响,而且可以诱导超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)等防御相关蛋白质,来延缓贮 藏果蔬品质的下降[2]。研究发现, 外源 MeJA 处理能够诱导番茄[3]、葡萄柚[4]、樱桃[5]、桃论文网

[6]、枇杷[7]等果蔬的抗病性。 

新鲜毛豆在采后衰老迅速并易受病菌感染而发生腐烂,不耐贮藏。本实验拟研究不同 浓度的茉莉酸甲酯处理对毛豆采后的抗氧化相关酶活性和腐烂率的影响,以寻找出茉莉酸 甲酯对毛豆保鲜的最佳处理浓度,为其在毛豆采后储运中的有效应用提供理论依据与实践 技术。 

1  材料与方法

1.1  试验材料

从淮安市菜市场上购买新鲜毛豆,选择大小、色泽和成熟度基本一致,无损伤、无腐 烂的毛豆作为试验材料。 

MeJA 的配制 :准确称取 MeJA 0.0472g,用蒸馏水使其充分溶解,并定容于 2000ml 容量瓶中,得到 100μmol/L MeJA 溶液,再将其稀释 100 倍、10 倍和 2 倍,得到 1μmol/L MeJA 溶液、10μmol/L MeJA 溶液和 50μmol/L MeJA 溶液[8]。 

1.2  试验设计与处理

将挑选后的毛豆按质量平均分成 4 组,其中一组用清水浸泡 60min 作为对照(CK), 其余 3 组分别按 1μmol/L MeJA 溶液、10μmol/L MeJA 溶液和 50μmol/L MeJA 浓度梯度 进行处理。晾干后,再将每处理组分为 3 个均等的重复组(500g/重复),用保鲜袋包装,

贮藏于 20℃恒温箱中,每 3 天取样检测下述指标。 

1.3  检测指标与方法

1.3.1 抗坏血酸 (ASA)含量的测定

 AsA 含量测定参照任亚琳等[9]方法。 

   制作标准曲线制作:配制浓度为 2,4,6,8,10,12,14mg/L 的 AsA 系列标准液。各 取 1.0ml 于试管中,加入 1.0ml 5%TCA,1.0ml 乙醇,摇匀。再依次加入 0.5ml 0.4% H3PO4

-乙醇,1.0ml 0.5%BP-乙醇,0.5ml 0.03% FeCl3-乙醇,总体积 5.0ml。将溶液置于 30℃下反应 90min,然后测定 A534nm。以 AsA 浓度为横坐标,以 A534 为纵坐标绘制标准 曲线,求出线性方程。 

     提取测定:取植物叶片 1.0g,按 1︰5(W/V)加入 5%TCA 研磨,离心(4000×g)10min, 上清液供测定。取 1.0ml 样品提取液于试管中,按上述测标准液相同的方法进行测定,并 根据标准曲线计算 AsA 含量。 文献综述

1.3.2 SOD 酶活性的测定

采用 NBT 光还原法[10],以50%抑制的酶液量(μL)为1个酶活单位。取0.5g 毛豆,于 0.05mol/L 磷酸缓冲液(pH7.0) 5mL 中,冰浴研磨,4℃冰冻离心机10000r/min 离心20min, 取上清液测定酶活性。取4支试管,1支为对照管,另3支为测定管。在测定管中加入0.1ml 粗酶液、3.1ml 0.05mol/L 磷酸缓冲液(PH=7.8)、0.2ml 1mol/ml EDTA-Na2、0.2ml 20mg/ml L-甲硫氨酸、0.2ml 0.1mg/ml 核黄素、0.2ml 1mg/ml NBT,置于4000lx 光照培养箱中反 应15min。对照管以磷酸缓冲液代替酶液,混匀后,将对照管置于黑暗中。在722S 分光光 度计上测定560nm 处吸光度值。

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