而高速逆流色谱技术（ High-speed Countercurrent Chromatography, HSCCC）由于其无需任何固态介质支持，且具有可重复进样，分离效率高，分离量大，可避免不可逆吸附、变性等优点。因此，广泛用于中草药成分的分离。刘浩，杭伟，周晓晶等人[4]以正丁醇—乙酸乙酯—5% Na2SO4（4:1:5,V/V）的两相溶剂体系论文网，通过HSCCC分离白芍中的芍药苷得到HPLC检测纯度在98%以上的芍药苷。俞静静等人[5]通过分配系数测定法选择的三氯甲烷—甲醇—水（4:3:2）的溶剂系统分离鉴定得到了四种蒽醌类化合物。陆英等人[6]以正己烷—乙酸乙酯—甲醇—水（2:5:5:3）的溶剂体系，利用HSCCC对紫锥菊中的物质进行分离纯化，得到了8个烷基酰胺类化合物。侯善欣等人[7]以茶多酚为粗样，经过两次高速逆流色谱分离得到2种高纯度的黄酮类单体。孙印石等人[8]以石油醚—乙酸乙酯—甲醇—水（2:4:4:3,V/V）的溶剂系统通过HSCCC从陈皮中分离得到3种纯度均达97%以上的黄酮类化合物。吴秋霞等人[9]采用pH-ZRCCC和HSCCC结合技术从大黄粗提物中分离得到高纯度的大黄素（纯度为96.5%）和芦荟大黄素（纯度为94.6%）。李成平[10]等人以石油醚—乙酸乙酯—甲醇—水（1:0.8:1:1.2,V/V）为两相溶剂系统，利用HSCCC从橘皮中分离得到4中多甲氧基黄酮类化合物。

TLC（薄层色谱法）是一种快速分离和定性分析物质的技术，可用于多种中草药成分的分析[11-14]。因此，大孔吸附树脂结合HSCCC和TLC可用于对中草药进行有效成分的分离纯化[15]。

1.1 高速逆流色谱

1.1.1 高速逆流色谱简介

高速逆流色谱技术（High-speed Countercurrent Chromatography, HSCCC）是由美国国立卫生院的Yoichiro Ito博士等人[16,17]于1982在逆流色谱（CCC）的基础上研发出来的一种不需任何固态支持介质的新型液-液分配色谱技术。与传统的的分离纯化方法相比，其具有显著优点，物质分离根据两相溶剂系统分配系数的不同来实现，故而非常适合于天然生物活性成分的分离。

1.1.2高速逆流色谱的特点文献综述

1) 适应性好，应用范围广：溶剂系统的组成和配比的无限种可能使其能够适用于几乎任何极性范围内的样品的分离。液-液色谱的使用消除了由于使用固体载体带来的不可逆吸附，特别适用于分离极性物质。

2) 不需固体载体，大大降低了操作成本，提高了制备量：由于使用液体作为固定相和流动相，有效解决了固体支撑体与样品之间的不可逆吸附、污染、变性、失活等问题，同时简化了样品的预处理工作，有利于样品的回收利用，减少了操作成本和样品消耗。

3) 分离能力强，产品纯度高，具有很高的重现性：可以同时实现多种化合物的分离，若选择到较优的溶剂体系，分离的样品纯度可高达90%。而且由于固定相和流动相都是液相，因此便于重复使用和重现实验。

1.1.3高速逆流色谱在天然产物分离纯化中的应用

在天然产物分离纯化方面，HSCCC用于分离生物碱类[18-20]、黄酮类、萜类、酚类[21]等物质[22-24]较多。高速逆流色谱法结合大孔吸附树脂、高效液相色谱法能够更有效地分离天然产物中的活性物质[25,26]。高速逆流色谱技术对于进一步对天然产物的探索性研究[27,28]具有重要意义。

1.2 高速逆流色谱的溶剂体系

1.2.1 溶剂体系选择原则

不同溶剂的理化性质存在差异，上下相之比不同，因而对溶剂系统的分配系数产生了影响。一般情况下，溶剂系统的分配系数在0.5-2之间的分离效果较好。同时最好保证色谱的保留率大于50%。