摘 要：酸化严重影响着作物的生长发育，并降低作物的产量。目前土壤酸化已经成为世界性的环境问题，也是制约我国农业生产的主要问题。小麦作为我国主要的粮食作物，小麦的产量影响着我国的农业的发展。本文以小麦为材料进行试验，通过样本处理、iTRAQ定量试验、质谱分析研究了酸化条件下小麦地上部分和地下部分的生理变化、蛋白质变化，并进行相关差异蛋白定量信息统计，来阐释酸化条件对小麦生长发育的影响。71525

毕业论文关键词：酸化、小麦、iTRAQ、质谱分析、差异蛋白

Abstract：Acidification a serious impact on crop growth and development, and reduce crop yields.Currently soil acidification has become a worldwide environmental problem, is also a major problem of agricultural production constraints.China's major grain crops as wheat, wheat production affects the development of agriculture in China.In this paper, wheat materials tested by sample processing, iTRAQ quantitative test, mass spectrometry to study the physiological changes acidified wheat aboveground and underground part of the protein changes, and protein by quantitative statistical information to explain acidification conditions wheat growth and development.

Keywords:Acidification, wheat, iTRAQ, mass spectrometry, differential protein

目   录

1  前言 3

1.1  酸化条件对小麦的生长影响 3

1.1.1  土壤酸化影响作物对N素的吸收与利用 3

1.1.2  土壤酸化影响作物生长的形态指标 3

1.1.3  土壤酸化影响作物生理活动 3

1.2  蛋白质组学简介 4

1.2.1  植物蛋白组学 4

1.2.2  同位素相对标记与绝对定量（iTRAQ）技术 4

1.2.3  蛋白组学的研究意义 5

2  材料与方法 5

2.1  材料的培养与处理 5

2.2  实验设计 5

2.3  生理指标测定 6

2.4  样本处理及 iTRAQ 定量实验流程 6

2.4.1  样品蛋白提取 6

2.4.2  蛋白定量（Bradford 法） 7

2.4.3  蛋白酶解（Filter Aided Sample Preparation,FASP） 8

2.4.4  iTQRAQ标记 9

2.5  酶解肽段离线预分离及LC--MS/MS质谱分析 10

2.5.1  高pH条件下的反相色谱分离 10

2.5.2  纳升级反相色谱- -Q Q  Exactive  进行蛋白质分析 12

2.6  质谱数据分析 14

2.6.1  数据库 14

2.6.2  检索软件 14

3  结果与分析 16

3.1  酸化处理下小麦生长表型差异及叶绿素含量变化 16

3.2  酸化处理下小麦抗氧化酶活性变化 16

3.3  蛋白鉴定结果 17

3.4  差异蛋白的功能分类