成骨细胞的分化是由各种因素,包括激素和转录的因素。转录因子是一个重要的角色及其分子,通过创建一个与其部分-蛋白复合物绑定因子βCbfb。然而,Cbfb表达的分子调控依然存在未知的。在这里,我们发现mir-145作为一个至关重要的监管机构Cbfb表达式。在成骨细胞中mir-145的表达增加,表明mir-145是一种抑制剂。稳定表达mir-145内生Cbfb表达和降低抑制miR-34c合作。此外,mir-145减少骨头再生的体内。研究结果表明,mir-145的生理调节成骨细胞不同阶段[10]。

成骨细胞分化是一个至关重要的过程在维护各种骨内稳态因素、信号分子和小分子核糖核酸(microRNA)。最近,信号反式-传感器和转录激活1(STAT1)被发现在调节发挥重要作用成骨细胞分化。在这里,我们发现STAT1表达式是由mir-194。使用老鼠骨骼间充质干细胞(BMSC),我们发现mir-194表达明显增加成骨细胞分化诱导。过度的慢病毒mir-194介导的基因转移显著增加成骨细胞分化,而抑制mir-194 bmsc的显著抑制成骨细胞分化。之间的直接交互mir-194和未翻译区(UTR)STAT1的证实。此外,mir-194规范bmsc STAT1的信使rna和蛋白质表达。进一步分析表明,mir-194超表达促进了核易位runt-related转录因子2(Runx2)对成骨细胞分化至关重要。相比之下,mir-194抑制屏蔽Runx2的核易位。此外,过度STAT1 Runx2明显阻塞核易位和成骨细胞分化由mir-194超表达。采取在一起,我们的数据表明,mir-194通过调制STAT1-调节成骨细胞的分化介导Runx2核易位[11]。文献综述

小分子核糖核酸(microRNA)发挥重要作用在成骨细胞的增殖和分化。最近报道,miR-15b充当一个积极的监管机构的成骨细胞分化,而它的功能在成骨细胞的增殖作用仍不清楚。在这项研究中,我们发现有增加人类成骨细胞的增殖细胞(MG63)当他们是暂时性的转染miR-15b抑制剂。相当水平的细胞群被发现在G0/G1期,减少增加在年代和G2/M期miR-15b抑制剂治疗。细胞周期素E1——被发现有效目标基因miR-15b,miR-15b模仿和miR-15b抑制剂治疗细胞减少和分别增加了细胞周期蛋白E1表达式。我们进一步发现,细胞周期蛋白E13直接有针对性的通过miR-15b使用荧光素酶报告基因系统。没有发现显著的影响在“分离”MG63细胞miR-15b抑制剂。因此,这些发现在理解提供新的见解的角色miR-15b表达式作为负调节成骨细胞增殖[12]。

本实验探讨Bio-oss与成骨细胞系MC3T3E1共培养对其成骨诱导分化的基因调节的影响,理解细胞成骨分化中的作用及作用机制,并进一步研究microRNA在体内促进骨组织再生中的作用。这将有助于我们了解microRNA细胞成骨分化中的作用,为临床研发新的更有效的骨组织再生方法开辟新的思路。

1。材料与方法

1。1实验材料

1。1。1主要试剂与仪器

1)药物和试剂

小鼠MC3T3-E1细胞系、胰蛋白酶、地塞米松、甘油磷酸钠、维生素C、alcoline磷酸酶 

2)主要仪器和设备

液氮罐、低温冰箱、恒温水浴锅、离心机、培养箱、细胞培养超净工作台、电子天平、倒置电子显微镜、超纯水仪、全自动高温高压灭菌锅

1。2实验方法 

1。2。1 成骨细胞系MC3T3E1复苏

从液氮罐中取出细胞冻存管,迅速放置到37℃水浴锅内摇动加速融化。用75%酒精消毒冻存管,在无菌室超净工作台上,打开冻存管用吸管吸出细胞悬液,注入离心管,加入10倍以上含10%胎牛血清的DMEM完全培养液,混合后低速离心,弃上清液后加入4mL含10%胎牛血清的DMEM完全培养基,将细胞悬液移到细胞瓶内于37℃细胞培养箱中过夜。48h后半量换液,以后每3d全量换液。通过静置贴壁法去除造血干细胞。倒置相差显微镜观察,待细 80%融合后消化传代。

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