2)POD活性测定:取20mL具塞试管6支,3支测定(3个重复),3支空白对照。各加入酶液1。0mL,0。1%愈创木酚1。0mL,蒸馏水6。9mL,摇匀,加入0。18%双氧水1。0mL(空白管不加,多加1。0mL,蒸馏水),摇匀(计时),25摄氏度下准确反应10min,加5%偏磷酸0。2mL终止反应。用标准曲线1号管调零,于分光光度计上测定3支测定管和空白对照管的A470。
3)结果计算:从标准曲线查出(或回归方程式计算出)测定管和对照管四邻甲氧基苯酚的含量(平均值,μg/mL),按下式计算出POD活性
POD活性(μg·g-1FW·min-1)=[(X-X0)*Vt]/(FW*Vs*t)
式中,X为测定管四邻甲氧基苯酚的含量(mg);X0为对照四邻甲氧基苯酚的含量(μg);Vt为酶液总体积(mL);FW为样品鲜重(g);Vs为测定时取酶液的量;t为酶作用的时间(min)。
2。3。3叶绿素含量的测定来*自-优=尔,论:文+网www.youerw.com
①实验仪器设备
研钵、25mL棕色容量瓶、漏斗、滤纸、支架、玻璃棒、剪刀、移液枪、烧杯
②实验试剂
95%乙醇、石英砂、
③实验材料
正常生长以及经逆境处理的鸭跖草叶片
④实验方法与步骤
1)取鸭跖草新鲜叶片,0。1g,用蒸馏水擦洗,去掉中脉剪碎,放入研钵中。
2)向研钵中加入少量石英砂和5mL95%乙醇,研磨成糊状后,在向研钵中加入15mL95%乙醇,静置5min。
取一张滤纸,折叠成漏斗状,然后置于漏斗中,用95%乙醇湿润,沿着玻棒将提取液倒入漏斗,玻棒放的位置应低于滤纸边缘,滤液流至25mL棕色容量瓶中;用少量的乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次,最后连同残渣一起到入漏斗中。
用滴管吸取乙醇,将滤纸上的叶绿体色素全部洗入棕色容量瓶中,最后,于分光光度计上测定提取液的A663和A645。
3)结果计算:由测得的A663和A645得
CT=20。29*A645+8。05*A663
2。3。4光合数据的测定
①实验仪器设备
LI-6400光合仪
②实验材料
正常生长以及经逆境处理的鸭跖草叶片
③实验方法与步骤
采用闭路式光合作用测定方法