0。15 120 36
0。175 120 42
NAA 0。025 120 6
0。05 120 12
0。075 120 18
(3)根据MS培养基配方配置120ML的MS培养基(表4),一次实验处理需配7瓶。
表4:120ML的MS培养基配方
试剂 用量
MS盐 0。5316g
蔗糖 2。4g
双蒸馏水 120ml
调PH 5。7~5。8
Agar 0。96g
(4)灭菌:根据后续实验所需,将所配的培养基进行分类即IAA类与NAA类各3瓶,剩1瓶对照,由于IAA为高温易分解物质,用于配置含IAA培养基的MS培养基先于高压蒸汽灭菌锅中121℃灭菌20min,之后于超净台中将IAA母液进行过滤灭菌并根据实验所需浓度逐一加入已灭菌的MS培养基中。用于配置含NAA培养基的MS培养基中直接加入实验所需浓度的NAA,混匀后将培养基放入高压蒸汽灭菌锅中121℃灭菌20min。来*自-优=尔,论:文+网www.youerw.com
(4)倒置培养基:将已灭好菌的培养基倒入一次性方形培养皿中,每个培养皿30ml,同种浓度培养基可配4个。一次实验共倒置28个方形培养皿。倒置好后,用医用胶带封口并于4℃冰箱保存,做好标记。
2。3。4。2拟南芥贴苗
(1)播种拟南芥:于一次性圆形培养皿中种植5种类型拟南芥,一种类型2个,共10个。播种过程中尽量保持播种整齐,经春化后,于培养室中竖直放置培养基,使幼苗的根竖直向下生长,有利于移苗过程中,根不会因为弯曲盘旋而损坏。