植物在长期适应自然的过程中,形成了一整套清除活性氧的抗氧化酶防御体系,包括超氧化物歧化酶(SOD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、过氧化物酶(POD)等。这些酶已广泛用于植物抗逆境反应机理的研究。正常条件下,植物体内ROS的产生与消除处于动态平衡,当其受到盐渍、干旱和低温胁迫时,ROS的代谢平衡被破坏,产生过量的活性氧等,直接伤害细胞膜、蛋白质和DNA,导致膜系统损伤和细胞伤害,从而导致植物代谢紊乱。抗氧化酶可以清除植物体内ROS,对维持细胞内代谢和保护细胞膜完整性具有重要作用。

一氧化氮(NO)是信号转导中应用最广泛的气体信号分子,被称为明星分子。一氧化氮在许多生理调控中都发挥着作用,如种子萌发、根生长、细胞凋亡、防御相关基因的表达以及植物的耐逆反应等[2]。已有实验证明,外源NO可提高 UV-B 胁迫下植物抗氧化酶活性和抗氧化物质含量,降低其 H2O2 含量及脂质过氧化程度,从而在一定程度上缓解 UV-B 胁迫对植物的伤害[3]。可能NO通过某种途径诱导了SOD,APX抗氧化酶基因的表达,增强了其活性。另外,NO对瓜果的保鲜也有作用。 2007年,根据马海燕等报道,NO处理很好地保持了砀山酥梨的硬度、可溶性固形物含量以及可滴定酸的含量,推迟了呼吸高峰出现的时间,降低了呼吸和乙烯释放的最高值,并且降低了砀山酥梨的腐烂率,表现出明显的保鲜效果[4]。NO对月季[5]、芒果[6]的保鲜效果也有报道。

    目前国内对菜豆的研究多集中于抗逆性的反应,对菜豆的保鲜少有报道。本试验研究不同浓度NO缓释剂SNP对新鲜菜豆室温贮藏期间SOD、POD、APX等抗氧化酶活性,MDA含量以及腐烂率的影响,为有效解决菜豆采后腐烂、黄化和品质劣变问题提供理论依据和技术参考。文献综述

1 材料与方法

1。1 试验材料

试验用的菜豆采购于淮安市菜市场。选择大小、色泽、成熟度基本一致,无腐烂和损伤的菜豆作为供试材料。

1。2 试验设计与处理

将挑选后的菜豆随机分成质量相等的4组,其中一组作为对照(CK),用清水浸泡1h。将其余3组菜豆分别以50μmol/L SNP、100μmol/L SNP和200μmol/L SNP溶液在干燥器中密闭浸泡1h。晾干后,将每组又均等质量分为3个重复小组,每个重复组500g。将所有样品包装于保鲜袋后,置于20℃培养箱中常温贮藏,每3天随机取样检测下述指标。

1。3 检测指标与方法

1。3。1 腐烂率统计

  观察菜豆腐烂情况,数出腐烂的菜豆数和菜豆的总数,计算腐烂率。

1。3。2 超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 

采用NBT光还原法[7],以50%抑制的酶液量(μL)为1个酶活单位。取0。5g果肉,于0。05mol/L磷酸缓冲液(pH7。0) 5mL中,冰浴研磨,4℃冰冻离心机10000r/min离心20min,取上清液测定酶活性。取3支试管,1支为对照管,另2支为测定管。在测定管中加入0。1ml粗酶液、3。1ml 0。05mol/L磷酸缓冲液(PH=7。8)、0。2ml 1mol/ml EDTA-Na2、0。2ml 20mg/ml L-甲硫氨酸、0。2ml 0。1mg/ml 核黄素、0。2ml 1mg/ml NBT,置于4000lx光照培养箱中反应15min。对照管以磷酸缓冲液代替酶液,混匀后,将对照管置于黑暗中。在722S分光光度计上测定560nm处吸光度值。

SOD酶活性(U/g。min)来`自+优-尔^论:文,网www.youerw.com +QQ752018766-

ACK——对照管的吸光值

AE——样品管的吸光值

VT——样品液总体积,ml

V1——测定时样品的总体积,ml

W——样品鲜重,g

1。3。3 过氧化物活性酶(POD)活性的测定 

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