（S）-（4-氯苯基）-（吡啶-2-基）-甲醇，是合成第二代抗组胺倍他司汀药物[2]的关键中间体。由于第一代抗组胺药物具有显著地中枢抗胆碱作用，因而受到一定的限制，而倍他司汀药物作为第一代的代谢物，药效比第一代强，一般无中枢抗胆碱作用，起效快，半衰期长，减少服药次数，提高患者的用药顺应性[3]，临床应用广泛，比如在过敏性疾病治疗领域占据重要地位[4-5]。因此，研究者越来越重视关键中间体（S）-（4-氯苯基）-（吡啶-2-基）-甲醇的合成[6]。制备手性化合物一般有化学法和生物法两种，虽然化学法制备拥有效率高，稳定性高的优点，但是它存在反应步骤多，反应条件要求苛刻，成本高，污染严重的缺点，使得化学法越来越不受人们的重视。与之相比，利用全细胞进行不对称还原法具有高立体选择性，对环境的的污染小，高催化活性，反应条件温和等众多优势，渐渐地成为研究热点[7]，而生物合成法在手性新药研究中也表现出很大的潜力，另外，有最新的数据和研究报告显示：生物制药技术的崛起成为近几年医药市场最大的变化，全球生物制药市场每年也在高速增长。文献综述

微生物细胞中的羰基还原酶系复杂多样，因此在还原合成反应过程中存在底物浓度较低，副产物较多，产物光学纯度较低的问题，从而导致底物利用率低，产物分离纯化困难的问题。而已有研究表明通过优化发酵产酶条件和筛选产酶菌株，可以高效地提高微生物菌株的产率和立体选择性[8-9]。本实验利用传统的经典筛选方法从富含微生物的土壤中首次成功筛选到可以产生羰基还原酶的Pichia caribbic m4c菌株，确认m4c菌株为酵母菌；进一步对它进行菌种鉴定以及细菌转化条件，考察最终产物（S）-（4-氯苯基）-（吡啶-2-基）-甲醇的产率和光学纯度的含量变化幅度。由此可见，从自然界中筛选菌株虽然耗时耗力，但是对一些很少研究的大分子底物或者新的底物，筛选获得立体选择性高和催化性高的野生菌株的传统做法的仍然是完成生物催化反应的最重要方法之一[10]，但是通过实验数据来看，利用微生物全细胞法还原合成（S）-（4-氯苯基）-（吡啶-2-基）-甲醇尽管存在光学纯度值和产率较低的问题，但是此方法具有较好的前景。

2  材料与方法

2。1  材料

2。1。1  菌种

实验使用的菌种均来自江苏淮安钵池山公园和生态园的20份土壤样品，经过利用筛选平板培养基和富集培养基培养分离得到一些微生物，这些微生物对底物具有耐受性，然后通过发酵培养基对这些微生物进行发酵培养和收取菌体以及进一步利用生物转化反应筛选菌体。来-自~优+尔=论.文,网www.youerw.com +QQ752018766-

2。1。2  试剂

底物（4-氯苯基）-（吡啶-2-基）-甲酮，葡萄糖，酵母粉，磷酸二氢钾，七水合硫酸镁，乙醇，磷酸钾，乙酸乙酯，正己烷，异丙酮，硫酸铵，氯化钠，琼脂粉，硼氢化钠还原制备外消旋（4-氯苯基）-（吡啶-2-基）