经过一系列的实验和分析得出结论，Indol-Hcl 法的测定原理是过量的亚硝酸将 氨基己糖分子中的 2 号碳位上的氨基脱掉，反应伴随着脱水，反应完成后氨基己糖 就转变为 2,5-己糖酐，与此同时 2 号位的碳的旋光性发生变化。在温度一定的情况 下，2,5-己糖配与酸性的吲哚乙醇会发生络合反应生成桔黄色的溶液，该溶液在波长 为 492 nm 处有吸收。试剂量的准确加入和脱氨处理是该方法的关键步骤。Indol-Hcl 法测定标样的相对误差在±0。5%～0。6%。Elson & Morgan 法的测定原理是在温度一 定的条件下，过量的乙酰丙酮碱性溶液可以使 D-氨基葡萄糖分子 2 号碳位上的氨基 乙酰化，生成带有吡咯环的 N-乙酰衍生物。此时加入对二甲氨基苯甲醛(酸性)，两 者立即发生络合反应，有紫红色的溶液生成，该溶液在波长 530 nm 处有吸收[18]。在 这个测定方法当中，氨基的乙酰化及显色测定是该方法的关键步骤。要保证待测液 在乙酰化前的 pH 值在中性范围内。当加入酸性的对二甲氨基苯甲醛时，发生络合 反应生成紫红色的溶液。颜色深浅会随时间而变化，因此在成色稳定时才能进行比 色测定。一般认为对二甲氨基苯甲醛加入后 90 min 为显色稳定时间。该方法测定标 样的相对误差为±2。8%。

Indol-Hcl 法和 Elson & Morgan 法测定氨基葡萄糖含量都是用化学修饰的方法改 造该分子 2 号碳位上的氨基。而葡萄糖是不带有氨基的，故不能进行乙酰化的反 应；脱水的过程无法进行，2,5-环氧酐也就无法形成进而继续反应。这样就能减小葡萄糖存在对氨基葡萄糖测定的影响，降低相对误差。由此可见，这两种方法在 D-氨 基葡萄糖测定方面都具有较高专一性。杂质的存在对两种方法的测定也有一定的影 响，根据 Elson & Morgan 法原理，若杂质本身就具有吡咯环或者会乙酰丙酮反应中 有吡咯环的产生，同样能和 P-DMAB 有络合反应发生，生成特定颜色的产物。色氨 酸存在时比较特别，它本身带有吡咯环，但实验结果显示其影响不明显，这可能是 因为其与显色剂反应需要在特定条件下进行，而方法中盐酸的浓度仅为 5%，不足以 使两者反应。要测定 N-乙酰基葡萄糖时，由于它与显色剂 P- DMAB 必须在强碱环 境中伴随加热才能显色，而本方法的显色是在酸性的环境中，因此 Elson & Morgan 法不适用于其测定。抗坏血酸、色氨酸、半胱氨酸等加入后对 Indol-Hcl 测定法时也 会引起偏差。除此之外，多糖水解是否完全对这两种方法的测定结果也有较大的影 响。水解不完全时，两种方法测定出的 D-氨基葡萄糖含量均远小于水解完全时的数 值。究其原因，可能是在多糖水解不完全时水溶液中除了游离的 D-氨基葡萄糖外， 还存在着低聚糖及其它大分子，两种方法的专一性也可见一斑[15]。来:自[优.尔]论,文-网www.youerw.com +QQ752018766-

也有学者在检测氨基葡萄糖含量时运用到了高效液相色谱法进行快速测定。实 验结果显示，氨基葡萄糖浓度在 1。6～2。4 g/L 范围内线性关系良好，检出限为 7。81 mg/L，精密度(RSD，n=6)为 0。53%；平均加标回收率为 100%，相对标准偏差为 1。1%。该快速测定方法省略衍生化步骤，使操作步骤被简化对人员的要求降低也减 小了误差。国外所运用的非衍生高效液相色谱法，对盐酸氨基葡萄糖中的氯离子含 量进行测定，再通过换算得到氨基葡萄糖的含量虽然操作简便但通用性较差。而相 较于上述方法，快速测定方法排除了氯离子、硫酸根及其他成分的干扰，直接检 测，时间短，通用性较高[16-17]。

1。3。4 氨基葡萄糖的生产方法

目前氨基葡萄糖的生产方法主要有：微生物发酵法、甲壳素水解法和酶生物转 化法。