2。5。2 VC含量的测定
吸取10ml滤液放入50ml锥形瓶中,用已标定过的2,6-二氯靛酚溶液滴定,直至溶液呈粉红色且15s不褪色为止。同时做空白试验。按式(4)计算:
VC含量(mg/100g)=(V—V0)*T*A/W*100 (4)
式中:V——滴定样液时消耗染料溶液的体积,ml
V0——滴定空白时消耗染料溶液的体积,ml
T——2,6-二氯靛酚染料滴定度,mg/ml
A——稀释倍数
W——样品重量,g
Ps:平行测定三次,用算术平均值表示。
2。6 苹果抗氧化指标的测定
2。6。1 DPPH清除率的测定
实验前用无水乙醇配制0。2mmol/L DPPH 乙醇溶液,置于棕色瓶中备用。准确吸取1ml样液置于试管中,实验组加入4ml 刚配制好的0。2mmol/L DPPH 乙醇溶液,对照组加入4ml无水乙醇,充分混合均匀。设置空白管,加入1ml 70%乙醇和4ml DPPH乙醇溶液,混合均匀,置于暗处反应30min。测定517nm 波长处的吸光度。DPPH清除率按公式(5)计算:
K(%)=[1-(A1-A2)/A0]*100 (5)
A1为实验组的吸光度,A2为对照组的吸光度,A0为空白管的吸光度
2。6。2羟基自由基清除率的测定文献综述
准确吸取1ml样液于试管中,实验组依次加入1ml 2mmol/L FeCl2、1ml 2mmol/L H2O2和1ml 6mmol/L水杨酸,对照组以蒸馏水代替2mmol/L H2O2,充分混合均匀,再添加5ml蒸馏水,振荡混合,置于37℃水浴中反应30min。空白管以70%乙醇代替样品。测定510nm处的吸光度。羟基自由基清除率按公式(6)计算:
G(%)=[B0-(B1-B2)]/B0*100 (6)
B0为空白管的吸光度,B1为实验组的吸光度,B2为对照组的吸光度
2。6。3还原能力的测定
准确吸取2。5ml样液于试管中,添加2。5ml 0。2mol/L pH6。6的H3PO4缓冲液和2。5ml 1% K3Fe(CN)6,混匀。置于50℃水浴中,反应20min后取出,添加2。5ml 10% C2HCl3O2,充分混匀,离心10min,转速3000r/min。然后取上清液5ml加入已添加0。5ml 0。1% FeCl3和4ml蒸馏水的试管中,混匀。静置10min后,于700nm处分别测定实验组和对照组的吸光度,观察吸光度的大小来评价还原力的大小。
2。7 数据统计与分析
应用Microsoft Excel软件对数据进行整理并作图比较分析,采用SPSS20。0 Duncan法进行单因素显著性分析,Pearson法进行相关性分析。所有实验结果均表示为平均值±标准偏差。