(2)含水量测定:将实验所得的七组样品按上述所编号进行测定,每个样品取样规格为20mm × 20mm,每个样品取3个同等规格。利用精密天平仪器进行重量称量,得到的数据记为W0,然后放在电热恒温鼓风干燥箱里,温度调到110℃,进行烘干,并进行每次称量,当得到称量的数值稳定在一定范围内时,记下数据为Wc。按照同等步骤,每个样品重复做3次,然后取平均值。根据以下公式计算样品含水量的数值。
含水量= ×100% (1)
(3)水溶性测定:将实验得到的样品编号,1-7组,每组称取1.5g的膜样品,放在电子分析天平上进行称样,重量记为W0,让后将样品浸在100mL的去离子水中,将其放在转速为1000rpm的实验室高剪切分散乳化机进行搅拌24小时,取出后,将样品进行真空抽滤,重复多次抽滤后,得到没有溶解的膜,将没有溶解的膜放在110℃的电热恒温鼓风干燥箱中,烘制到质量变化稳定后,称量重量记为Wi,然后根据如下公式计算出合膜和壳聚糖单一膜的在水中的溶解度。
溶解度= (2)
(4)溶胀性测定:将上述所得到的膜样品编号,其中1号为不加氢氧化钾中和的壳聚糖单一膜,2号为加氢氧化钾中和的壳聚糖单一膜,3-7号为以2%,4%,6%,8%,10%壳聚糖的量添加弗罗里达橘子油,每个样品分别称取0.4g,称重记为W0,让后将样品浸入到30mL的去离子水中,浸泡24小时后取出,用滤纸吸干多余的水分,然后在称重,数据记为Wh。每个样品重复3次,求到数据后取平均值。分析其不同成分膜的溶胀指数,溶胀指数由下面公式所求的。
溶胀指数= (3)
2.3.5 机械性质的测定
将已制备好的七组膜进行取样,将根据美国试验材料学会标准D882 (ASTM, 2001),将膜剪制成矩形的样品形状,规格为25.4 mm×100 mm,然后调制好物性测试仪参数,调制到A/TG模式,两夹头间距离为80mm,测速调到1.0 mm/s,测力传感器为50N。然后将每个样品放在物性测试仪上,启动仪器,将其拉断,通过查阅公式计算,将会得到拉伸强度和断裂伸长率的数据,然后每个样品重复测试3次[17-18]。
2.3.6 膜的微观形态
将上述样品膜编号,总共七个样品,然后把样品膜剪成规格为6 mm×2 mm的样式,然后打开扫描电镜,检查机器一切数据参数是否都正常,当仪器正常工作时,把扫描电镜调制高真空,发射电流为70.0μA,加速电压为15.0kV,将每个样品依次放在扫描电镜进行每组膜的上表面的表面形貌。得到样品的扫描电镜图片,进行样品形貌分析[19]。
2.3.7 抗菌性的测定
首先,准备20个培养皿,洗干净之后放在电热恒温鼓风干燥箱中1小时,干燥后用报纸包装好,每五个一组,准备6个1mL的移液管,5个0.1mL的移液管和一个10mL的移液管,将其洗净用报纸包装好,取10个试管,将其洗净后,同样放在电热恒温鼓风干燥箱中1小时,待其干燥后用报纸包装好,称取38g营养琼脂,加入到1000mL蒸馏水中,在恒温磁力搅拌器,边加热别溶解,待溶解完全将其分装到4个锥形瓶中塞好瓶塞,用报纸包装好瓶口。将上述准备好的材料仪器放在手提式不锈钢压力蒸汽灭菌锅中,将参数调到121℃,待其达到121℃并且在高压下文持20min。对壳聚糖膜进行取样,每个膜取三个样品,其中取膜直径为14毫米。将垂直层流洁净工作台的紫外灯打开半小时后,然后将所有材料和仪器等放到紫外灯下照射半小时,之后关闭紫外灯,将菌种带到垂直层流洁净工作台开始操作。操作前,用已配制好的75%的医用消毒酒精,对双手进行消毒。将营养琼脂进行到平板,对40个培养皿进行编号,至冷却凝固。将试管培养的大肠杆菌种加入5mL无菌水,用接种环将其溶在无菌水中,用移液管移取1mL倒入1号试管中,加入9mL无菌水,待其混合均匀后,从2号试管移取1mL倒入3号试管中,然后加入9mL无菌水,以此类推到6号试管。用2号试管中的大肠杆菌菌种进行用0.1mL的移液管各移取0.1mL到1-14号培养皿中,用接种环进行涂布,然后将准备好的壳聚糖单一膜和壳聚糖-弗罗里达橘子油复合膜的样品放到培养皿中,其中1号样品为不加氢氧化钾中和的壳聚糖单一膜,2号为加氢氧化钾中和的壳聚糖单一膜,2-5号样品为精油量为壳聚糖量的2%,4%,6%,8%,10%,每个膜样品分别放入到两个培养皿中,为1-14号培养皿,另外15与16号培养皿只用4号试管中的大肠杆菌移取0.1mL,只进行涂,不加入样品。同样17与18号培养皿用5号试管中的大肠杆菌涂布,19与20号培养皿用6号试管中的大肠杆菌进行涂布。15-20号培养皿中用作计数菌种,进行抗菌性分析。最后,将上述20个培养皿放到37℃的生化培养箱中,培养24小时之后,将其取出,放在紫外灯下将其杀死,然后观察聚糖单一膜和壳聚糖-弗罗里达橘子油复合膜的抗菌性,分析抗菌性强弱因素[20]。
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