糖蛋白是指由比较短的,往往带有分支的寡糖与多肽共价连接而成的一类结合蛋白质[2]。1908年美国生物化学家协会的蛋白质命名委员会首次将糖蛋白定义为:由蛋白质分子和除核酸外的包含有碳水化合物基因的物质共同组成的一类复合物(compounds of the protein molecules with a substance or substances containing acarbohydrate group,other than nuleic acid)[3][4][5]在自然界中,糖蛋白广泛存在于动植物和某些微生物中,甚至于还存在于单细胞有机体和病毒中,在生物体中他们以各种形式存在于细胞膜、细胞质、血浆以及粘液中。如细胞膜中的免疫球蛋白,病毒和激素等的膜受体;血液中的激素蛋白质(促滤泡激素、促黄体激素等),血浆蛋白质(血清清蛋白、运铁蛋白等);作为胞外基质的,胶原蛋白和层粘蛋白等。事实上,80%以上的蛋白质都是糖蛋白,包括许多酶、激素、毒素、载体蛋白、免疫球蛋白、结构蛋白、凝集素、受体、粘液组分等,甚至过去人们一直认为是“纯”的多糖,如糖原和纤文素,亦含有少量的共价结合的蛋白质[4][6]。近十年来,随着分离分析技术和分子生物学的发展,人们对于糖蛋白中的糖链结构和功能有了更深的了解。发现细胞识别包括粘着、接触抑制和归巢行为,免疫保护(抗原与抗体),代谢调控(激素与受体),受精机制,形态发生、发育、癌变、衰老、器官移植等,都与糖蛋白的糖链有关[7]。由于糖蛋白的重要作用和广泛存在,目前糖蛋白已经成为了各个前沿学科的研究热点,包括生物学、化学、生物化学、细胞生物学、免疫学、医药学以及食品科学等。
本次实验中,我们主要采用水提硫酸铵沉淀法和水提醇沉法提取糖蛋白。水提法的提取溶剂为蒸馏水,根据提取物的性质选取核实的温度、料液比和提取时间。水提法操作简单,无需特殊仪器,且节约成本。纯化方法则采用DEAE-52纤文素柱层析法,主要原理是根据样品在各流动向中的分配系数不同,从而达到分离的目的。
综上所述,糖蛋白具有非常广阔的应用前景,虽然国际上已经是比较热门的领域,但是国内的起步比较晚,不管是在结构测定还是生物活性确定等方面,我们与发达国家还有一定的差距。经过已有的大量的科学研究表明,我国许多传统的中草药中的多糖具有比较大的应用价值,比如说有香菇多糖、山楂蜂花粉多糖、山茶蜂花粉多糖等等。枸杞作为一种最常见且有巨大功效的中草药,目前鲜有对其蜂花粉糖蛋白的提取、分离纯化和研究,因此,从枸杞蜂花粉中提取糖蛋白具有实际意义。
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