为分析猫眼草有效成分,早在1970年,尚天明[7]等就对其进行了化学成分的研究,并首次从中检测出了一种具有新型结构的香精豆类成分,命名为猫眼草素。研究利用聚酰胺柱层析等方法,分离到了六种结晶,经IR、UV、MS与NMR等方法的分析并进行了相关性质常数的测定后鉴定出五种结晶。
抑菌圈法是在培养基上施以少量待测物质及病菌,若物质具有抗菌特性,则施加待测物的周围会产生抑制病菌生长空白区,根据其来计算待测物的相对抑菌率。陈学文[6]采用此法测定了五朵云粗提物对8种植物病原菌的抑制作用。结果表明当在培养基中加入提取物浓度为0。01g/ml时最高,8种病原菌的相对抑制率均在50%以上,对小麦赤霉菌的抑制率更是可达90%以上。
在癌症治疗方面,猫眼草也有不错的疗效。肖宝红[8-9]验证了猫眼草种子提取物对小鼠肺癌细胞的抑制效果,发现从猫眼草种提取的物质对肺癌细胞的增殖有明显抑制作用,且抑制效果与提取物使用剂量呈正比,并且通过对猫眼草毒性的相关实验发现,在饲料中添加猫眼草后,受试小鼠的血液系统无明显毒性反应。
迟静[10]等用猫眼草全草水煎药液治疗临床癌症患者10天一疗程经3到4个疗程后,20例患者临床症状明显减轻并且提高了免疫力。高志良等[11]以猫眼草为主药开药方治疗早期肝癌患者。使用电子计算机断层扫描仪扫描后分析结果发现患者肝脏的结节状性状逐渐消失,使用猫眼草治疗早期肝癌的疗效极为显著。蔡鹰等对猫眼草根于体内及体外的抗肿瘤作用进行了研究,发现猫眼草水提物在体外能明显延长三种癌细胞的增长周期,并影响其生长特性,抑制率数值与使用猫眼草水提物的剂量呈正比。
泽漆,在古代又名猫眼草[12],但事实上猫眼草并非泽漆,相似但不同,虽然同属大戟科, 但品种不同, 化学成分组成不同, 二药的虽然都具有相似的药理作用,但疗效作用机制也不尽相同。因此, 需注意鉴别, 正确处方药品名称,区分二药,不可混用,防止出现不良后果。
本实验采用的水蒸气蒸馏法[13]是指使用煮沸蒸馏水产生的水蒸气通入装有绞碎原料的圆底烧瓶,原料中的挥发性成分被水蒸气带出后经冷凝管降温凝结落入锥形瓶。此提取方法基于道尔顿分压定律[14],水蒸气蒸馏法适用于具有挥发性、强耐热性,在水中溶解度低或不溶于水并且不因提取过程而产生变性的物质的提取。水蒸气蒸馏法在各类生产活动中如精油提取等都有使用。回流提取法[15]是用采用挥发性有机溶剂(本实验采用乙酸乙酯)来提取原料,经持续加热后,样品中挥发性有机溶剂被蒸出,而后又被低温冷却,此过程一直重复,有机溶剂也不断的回流接触圆底烧瓶中的浸提原料。如此,直至原料中有效成分提取完全。 由于在蒸发锅中受热时间较长(通常2到5小时),故有些原料成分会受热遭破坏,因此不适用于此类原料的提取。本文利用GC-MS气质联用仪对水蒸气蒸馏法和乙酸乙酯回流提取法提取的物质进行检测,从样品中取适量后用乙酸乙酯进行稀释然后进样。对两种提取法检测出的物质进行比较探讨,确定猫眼草中所含的化学物质。
1材料与方法来*自-优=尔,论:文+网www.youerw.com
1。1。材料
猫眼草新鲜整株500 g(购于市场)
1。2试剂
乙酸乙酯(分析纯),去离子水(自制)
1。3仪器
Thermo气质联用仪、KDM(B)型调温电热套、JZ-SY 5000旋转蒸发仪、圆底烧瓶、冷凝管、郑州长城实验用循环水式多用真空泵。
1。4实验方法
通过水蒸气蒸馏法及回流提取法提取猫眼草全株中所含物质,然后使用GC-MS气质联用进行检测,将取得的样品放入顶空进样平内,放入水浴锅中加热,1-2分钟后,用进样针抽取进样瓶内空气,最快的速度将进样针插入仪器进样口,执行GC-MS分析。通过对比分析结果及CAS数据库查询,鉴别猫眼草中的化学物,通过归一法计算各成分相对含量。