药材：来自徐州贾汪、安徽亳州、黑龙江哈尔滨、河南郑州四个地区的刺五加。

1。2药品与试剂文献综述

甲醇、盐酸、偶氮二异丁腈（AIBN）

1。3仪器设备

安捷伦1260高效液相色谱（美国安捷伦科技有限公司）、自制毛细管色谱柱，扫描电子显微镜（日立S3400）。 

1。4方法

1。4。1毛细管色谱柱的制备

取弹性毛细管柱，先用0。1mol/L的NaOH冲洗2-4h，再依次用去离子水冲洗30-60 min，0。1mol/L盐酸冲洗10-15h，去离子水冲洗至中性，最后用氮气吹干。将毛细管柱的一端用橡皮塞封口，把C18填料用引发剂AIBN进行溶解，制备成乳浊液，用注射器注入毛细管中，再用橡皮塞封住入口，至于60℃水浴锅中反应12h，转移至微波炉中，低功率微波辐射10-20min，用水以0。05ml/min流速冲洗出多余的物质，氮气吹干，最终得到毛细管色谱柱，用扫描电子显微镜表征。

1。4。2色谱分析条件

流动相A为0。1%磷酸水溶液, B为乙腈, 梯度洗脱:0 min:B (10%), 15 m in:B (10%), 30 min:B (16%), 40min:B (16%), 40。1 min:B (10%);检测波长为220nm;柱温为35℃。在选择的色谱条件下，样品中刺五加苷 B、E与相邻色谱峰的分离度均高于1。5，符合条件要求。

2 结果与分析

2。1 自制毛细管色谱柱表征

 自制毛细管色谱柱填料（左）及色谱柱横截面（右）

Fig。1 Self made capillary column packing (left) and chromatographic column cross section (right)

通过电子显微镜表征，我们可以看出自制的色谱填料粒径大约在2-5μm之间，可以紧密排列在弹性毛细管柱。填料之间的孔隙可以为溶剂的顺利通过提供通道。通过电子显微镜表征，自制的弹性毛细管柱填料填充较好。来*自-优=尔,论:文+网www.youerw.com

2。2 线性关系的考察

电子天平精密称量样品刺五加苷 B与刺五加苷 E 提取物10 mg，分别放入25ml容量瓶中，加入少量 DMSO溶解样品，并用50%甲醇溶液稀释至容量瓶刻度。微型液相质谱仪分别进样10μL，测定峰面积，以对照品质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制色谱图标准曲线。刺五加苷 B的回归方程为y=32。87x-23。2, r=0。9995，线性范围：0。08~2。97 μg，刺五加苷 E回归方程为y=20。92x-31。4, r=0。9997, 线性范围：0。12~3。08 μg。结果表明刺五加苷 B在0。08~2。97μg与峰面积具有良好的线性关系，刺五加苷E在0。12~3。08 μg有良好的线性关系。