用于检测微囊藻毒素的方法有很多,例如生物分析法、细胞毒性检测法、酶联免疫吸附法(ELISA)、高效液相色谱法(HPLC)、毛细管电泳法(CE)、蛋白磷酸酶抑制法等,这些方法都有各自的优点,但又有不同程度的缺陷性.生物检测法不能区分微囊藻毒素的异构体,工作量很大;细胞毒素检测法的灵敏度较低;高效液相色谱法的预处理过程繁琐,设备昂贵;CE法的重现性差;蛋白磷酸酶抑制法不能区分特异的毒素同系物,且后处理困难。

高效液相色谱法(HPLC)是最常用的微囊藻毒素分析方法之一。自然界中微囊藻毒素常以痕量形式存在且干扰物质较多,所以色谱检测前必须先将样品通过萃取、吸附、富集等预处理,净化洗脱,再将洗脱液进行HPLC色谱分析,经检测器检测,将样品色谱图的保留时间和峰面积与标准品比较,从而进行定性和定量。HPLC检测微囊藻毒素-RR主要使用的检测器有紫外(UV或VWD)、荧光(FL)、化学发光(CL)、二极管阵列(PDA 或DAD)等,最常用的是紫外和二极管阵列检测器。微囊藻毒素-RR是一种环状多肽,其共轭双键在238 nm下有最大吸收,故可通过紫外检测。紫外检测器成本较低,但微囊藻毒素各种异构体之间的特征吸收很接近,也就是说,紫外检测器在识别微囊藻毒素过程中存在相互干扰的缺陷,影响测定准确度;另外如果有其他物质伴随微囊藻毒素一同洗脱出来,其单波长吸收峰就会受到干扰。二极管阵列检测器比单波长紫外检测器分辨率高(它有一个特定的光谱吸收范围,通常是190nm~280nm),噪音低,线性范围宽,其缺点是流动相的选择有一定限制,流动相的截止波长必须小于检测波长。

HPLC可以对微囊藻毒素-RR进行定性和定量,是了解微囊藻毒素-RR化学性质甚至结构的重要手段,但是它对高纯度标准品高度依赖,而由于技术的限制,商业用标准品又非常有限,这就限制了HPLC测定微囊藻毒素-RR的发展。

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