1。4。1丝胶蛋白的组成

丝胶蛋白是一种高分子球状蛋白,由18种氨基酸组成,其中Ser、Asp和Gly的含量最高,相对质量分别达到了32。43 %、16。75 %和18。49 %。丝胶蛋白的二级结构以β构象,β-折叠和β-转角含量无显著差异;无规卷曲和α螺旋结构含量较少。在蚕茧中,贴着丝素层的丝胶含β构象较高,但外层的丝胶蛋白二级结构易受到环境因素的影响,部分无规则卷曲能不可逆的转化为β构象[8]。对产生丝胶蛋白的基因进行基因测序,发现其中9个外显子中的2个外显子含有氨基酸重复单位的结构,此重复结构中丝氨酸密码子(AGU、AGC)占41。8%,因此丝胶蛋白中可能含有结晶区。

丝胶蛋白的分类方法有多种,通过盐析的方法分离丝胶蛋白,可得到易溶性丝胶和难溶性丝胶;进一步将蚕茧加水煮沸一定时间,可分离出三种不同水溶性的丝胶。将蚕茧中提取出的丝胶溶液进行紫外分光光度法分析,发现可得到四种吸光值不同的丝胶。若从组织学的角度分析,蚕茧中的丝胶可分为三种:内层丝胶、中层丝胶、外层丝胶。基于丝胶蛋白存在于蚕的中部丝腺,人们把中部丝腺分为5个部分,将各个部分的蛋白质分离出来,进行SDS-PAGE凝胶电泳,分离出分子量不同的5中多肽。用基因工程技术检测,发现丝胶蛋白含有9种多肽[9]。

1。4。2丝胶蛋白的生物活性

近年来世界各地的研究学者们发现丝胶蛋白具有多种生物活性,如保湿、抗冻、抗菌、抗炎、抗氧化、抗凝血、抗癌以及促进细胞黏附和增殖等[10]。丝胶蛋白还具有高生物相容性和低免疫原性、亲水性和生物降解性,肽链中含有较多的氨基、羟基和羧基等官能团,因此,便于引入其它基团进行改性和交联。由于丝胶蛋白已被广泛应用于美容和化妆品行业中,因此丝胶蛋白在组织工程材料的研究与开发日益受到人们的关注,有关利用丝胶蛋白制备丝胶冻干膜或性质脆弱的丝胶水凝胶以及丝胶蛋白与其他材料共聚、简单交联或混合制作生物支架以获得性能优良的生物材料的报道也日益增多。

(1)丝胶蛋白具有水溶性和吸水性

在丝胶蛋白的组成中,极性氨基酸占74。61% ,从而使丝胶具有良好水溶性。蚕茧中的丝胶蛋白在冷水中可吸水膨胀,在热水中可逐步溶解,而人工的丝胶蛋白粉末在冷水中即可溶解。将丝胶蛋白溶液在常温常压下自然放置,可以得到受热可逆的丝胶蛋白水凝胶。液态丝胶向水凝胶转化的温度一般在60℃以下,水凝胶向丝胶蛋白溶液转化所需温度范围为50~70℃。在丝胶溶液向水凝胶转化的过程中,伴随着蛋白质二级结构中部分的无规卷曲不可逆转化为β构象。

(2)丝胶蛋白具有良好的生物相容性

早期人们认为丝胶蛋白会引起免疫原性,也有的学者认为丝胶和丝素在一起会引起免疫原性。但近些年的研究表明丝胶本身不会引起免疫原性。科学家针对丝胶蛋白能否引起炎症反应进行了研究,对了丝胶蛋白对小鼠单核细胞核巨噬细胞中炎症因子白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子(TN-α)表达水平的影响进行评估,又评估了丝胶蛋白促进皮肤伤口愈合的效果。综合数据表明,丝胶导致的炎症水平不但较对照组低,而且能更加有效地促进伤口愈合。之后又在小鼠体内试验中证实了丝胶具有显著的抗炎作用。同时Pornanong Aramwit等[11]采用不同方法提取丝胶,并对这些不同提取方法获得的丝胶蛋白的生物相容性进行研究,发现以上丝胶蛋白均对细胞无毒,并且还能促进胶原合成和细胞的增殖。文献综述

(3)丝胶蛋白具有抗菌性能

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