黄酮类化合物广泛地存在于各种植物中，而且这类物质的生理活性很多样，因而国内外科学家对其的研究热度一直不减。不论是在对黄酮类化合物的提取分离方面，还是在对其结构测定的研究方面，近年来都提出了很多不同的方法，各种方法也有着不同的优点和缺点。76628

2马尾松树皮中黄酮类化合物的提取方法

马尾松树皮提取物主要是由水、醇-水溶剂浸提得到的，此外还有超临界流体萃取、超声波提取、微波提取、磁场强化萃取、酶解等方法。

1有机溶剂浸取法[6]

水浸提取法是最早开始用的提取方法，此方法的特点是设备简单、成本低，最重要的是对人类和环境没有毒害，但这种方法的缺点是提取率偏低、杂质的含量比较高，后处理难度较大等。有机溶剂浸取法中最常用的是酮、醇提取法，比如以提取剂为丙酮的方法有四种：(1)丙酮提取-四氯化碳萃取法；(2)丙酮提取-氢氧化铅沉淀法；(3)丙酮提取-氨水沉淀法；(4)丙酮提取-硅藻土过滤法。(1)法工艺产品黄酮含量太低，达不到标准，(2)~(4)法工艺虽然能较好地从马尾松树皮叶中提取出有效成分含量较高的提取物，但它们存在着很多的缺点。例如：使用了丙酮、四氯化碳等有毒溶剂了以后，产品中无法避免的含有这些物质的残留物；操作复杂和步骤偏多， 导致收率低且最终精制品的质量不够稳定。乙醇和丙酮对活性成分提取率相近，但考虑到溶剂的成本和操作的安全性， 使用乙醇水溶液比丙酮水溶液更合适[7]。

    该方法主要用到的实验试剂和仪器有：马尾松树皮、氢氧化钠、无水乙醇、硝酸铝、芦丁、亚硝酸钠、二氯甲烷和甲醇，均为分析纯。723可见分光光度计、DF-1型集热式磁力搅拌器、RE-5285 A型旋转蒸发器、恒温水浴锅、电热鼓风干燥箱、SHZ-CD型循环水式真空泵等。论文网

该方法的实验步骤比较复杂，首先需要将马尾松树皮洗干净，在低温下烘干至恒重，准确称取0g，置于索氏提取器中用甲醇回流提取至提取液无色；将提取液浓缩，并转入50 mL 容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，取1 mL 按照标准曲线的作法测定吸光度，由吸光度计算出溶液的浓度c，进而计算浸取液中总黄酮的含量及浸出率。

2超声提取法[8]

 超声波能对媒质产生机械振动和空化作用，马尾松树皮细胞壁在其物理作用下破碎，强化了黄酮类化合物的提取。超声波振动产生并传递强大的能量，使媒质的运动加速继而使结构发生变化，促使马尾松树皮中的黄酮类化合物进入提取溶剂中。同时超声波还具有许多次级效应，加快了提取物的溶解及扩散速度。超声波提取法的设备简易，操作便捷，而且提取所需的时间少、提取产率高、产物易分离，在提取马尾松树皮中黄酮类化合物的方法中优势突出，也是近年来马尾松树皮中黄酮类化合物提取领域的研究热点。超声波提取技术的稳定性以及重复性好。此外，超声波还具有一定的杀菌作用，同时其絮凝作用使得浸出液易澄清过滤，有利于后期产品的精制纯化，工业化应用潜力巨大[9]。

该方法主要用到的实验仪器：722型光栅分光光度计、KQ-100B型超声波清洗器、电子天平、DZF-6050 真空干燥箱、UV-2401紫外分光光度计、冷凝回流装置、JJ-1增力电动搅拌器、R-201 型旋转蒸发仪、80-2型离心沉淀机等。

该方法的实验步骤：马尾松树皮，洗净后自然阴干，60℃恒温烘干6h，粉碎后过筛，备用。取已粉碎马尾松树皮5 g于250 ml 烧杯中，按液料比加水，在不同条件下( 原料破碎程度、超声波频率、温度、超声时间、静置时间) 处理后抽滤，将滤液定容，为待测液。马尾松树皮总黄酮提取率计算方法。马尾松树皮总黄酮提取率( %) =C2/C1×%(C1是马尾松树皮中黄酮类化合物总含量；C2是提取液中黄酮类含量。)