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(4)将反应板倾斜,观察红细胞有无泪珠状样流淌,以出现无泪珠样流淌(100%凝集)的最高稀释倍数为该抗原的血凝效价。
1.2.1.4 定量杀灭法
(1)方法内容
将样品原液用灭菌生理盐水稀释740倍,配制成2×105EID50/0.1ml的NDV悬液,吸取2×105 EID50/0.1ml的NDV2.5ml,分别加入稀释度为1:500、1:1000、1:2000的戊二醛癸甲溴铵溶液(体积比1:1)及生理盐水(对照组)中,充分摇匀,置室温5min,吸取1ml混合液,再加入9ml中和剂,充分摇匀,作用10min,取生理盐水组中和剂作用产物,用灭菌生理盐水进行10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6梯度倍比稀释,1:500、1:1000、1:2000组分别用灭菌生理盐水进行5-1、5-2、5-3、5-4梯度倍比稀释,每个稀释度接种5枚鸡胚,每胚尿囊液接种0.2ml。弃去24h前死亡的鸡胚;24h后死亡的鸡胚及时取出冷冻,并对死胚和活胚逐个取胚液作血凝(HA)试验(参照1.2.1.3),计算各组EID50,测定各组病毒滴度。
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表达传染性法氏囊病毒VP2和法氏囊素三肽嵌合基因重组火鸡疱疹病毒的构建
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