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    1.2 微萃取概论

    微萃取是一个经典的样品制备技术,它提取相的体积在微升范围或者是相对于样品的量和分析物中占据量都非常小[10]。其提取效率是基于样品基质和提取相之间的分析物的分布平衡。传统的微技术,如液相微萃取(LPME)[11][12]和固相微萃取(SPME)[13], 这些方法已经被广泛用于复杂的样品基质前,色谱和毛细管电泳分析的分离或预处理过程中,因为该技术能够快速地在无环境污染的情况下进行分析,其运行成本相对较低,而且它能提供高的选择性和灵敏度。

    1.3 菊花概论

    菊花( Chrysanthemum morif olium Ramat) 为常用中药, 具有疏风、 清热、 明目、 解毒功效, 临床上用于治疗高血压和冠心病[14] 。菊花品种繁多且用途广泛,按其作用不同, 可分为观赏菊、 茶用菊、食用菊和药用菊; 其中野菊花为其同属菊科近缘的干燥头状花序, 不仅具有抗菌、 消炎之功效, 还能促进心肌循环, 用于多种炎症和皮肤瘙痒等症[15] 。菊花,最早以鞠华之名被载于《神农本草经》一书中,又名甘菊, 后因产地和加工艺的不同且其在市场上流通广泛,菊花逐渐形成了不同的商品名称,如贡菊、亳菊、杭白菊、川菊和祁菊等名称。菊花,可分为食用菊、茶用菊、药用菊、以及观赏菊,因此深受各国人民的关注与喜爱。据记载,开封人喜爱菊花,一直保留着吃菊花的习俗,在当地,菊花可以做成多种食品,如菊花粥、菊花羹、菊花糕、菊花饼、菊花啤酒、菊花馒头、菊花面包等。菊花还可以用来泡茶饮用,俗语有云:常饮菊花茶,老来眼不花。菊花茶沁心爽口,香气浓郁,不仅能解渴,还能解除困乏,起到提神的效果,是一种老少皆宜的常用饮品, 此外, 菊花还是一种重要的药材,据《本草纲目》记载, 菊花甘平,稍苦,无毒,具有清风热,治头晕目眩,疗眼疾与肌肤湿痹,轻身耐老延年之功效,此外,现代的药理研究证明其还具有解热、抗炎、抗衰老、抗诱变、抗氧化、抗癌、抗突变、抗病原微生物等作用。菊花的种属和产地不同, 其化学成分及含量也有差异, 主要含有黄酮类[16-17]、挥发油类[18-19]、酚酸类[20]、氨基酸和糖类 [21] 等活性物质。黄酮类是以2-苯基色原酮为基础的一些化合物,具有抗氧化、抗衰老、抗癌、抗肺瘤、降血脂、降胆固醇、保护心脑血管以及镇痛和免疫调节等多种广泛的药理作用,近年来对菊花中具有生理活性的黄酮类化合物的研究越来越受到人们的重视, 其中木犀草素对治疗咳、 痰、 喘症状有疗效, 而且有降低兔实验性动脉样硬化和胆固醇的作用, 大鼠皮下注射, 有增强毛细管通透性的作用[22], 是菊花中的有效成分之一。绿原酸具有活性经基,可以发生一系列氧化反应,因此具有抗氧化活性;此外,最新研究表明绿原酸具有抗病毒论文网、抗血凝以及保护心血管等多种生物活性。中国药典把绿原酸作为菊花含量的测定指标123]。因此,提取和定量分析菊花的化学成分具有重要的理论和实际意义。

    基于上述背景,有效检测菊花中酚类成分将有助于菊花分析工作的开展。目前,已有较多文献报导对菊花中酚类成分的检测,但检测的方法和使用的吸附剂较为单一。截止目前,以壳聚糖分散的多壁碳纳米管作为吸附剂在中药的固相微萃取方面应用偏少。且该方法在菊花提取、富集环节尚未见报道。

    本实验的目的在于寻求一种比以往富集方法更加快捷、高效的技术,用于提取富集天然产物中的活性成分。实验要点在于将微量的壳聚糖分散的多壁碳纳米管作为一种新型的吸附剂,巧妙地结合分散微固相萃取技术的优势,再利用高灵敏度的UHPLC-QTOF-MS进行检测分析。本实验利用壳聚糖具有类似于阳离子表面活性剂的特点,将其用于分散多壁碳纳米管, 从而克服了碳纳米管难以分散在水中的缺点。此外,多壁碳纳米管的表面积很大,能对物质进行选择性吸附,使得天然产物中活性成分的富集效果十分显著。本实验具体提供了一种由微量壳聚糖分散的多壁碳纳米管分散液作为新型吸附剂的方法,可用于富集与检测菊花植物提取液中的酚类有效成分。

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