曲克芦丁保护BDE-47诱导的小鼠肝脏NAD+耗竭(3)

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2 材料与方法

2.1 实验材料

2.1.1药品及试剂

BDE-47(纯度>98%，购自Chem Service)，玉米油(购自Sigma-Aldrich)，曲克芦丁(纯度>99%，购自宝鸡方晟生物开发有限公司)，兔抗NAMPT抗体, 兔抗 PARP1抗体 (购自Santa Cruz Biotechnology)，PARP1活性检测试剂盒(购自Trevigen Inc.)，EnzyChromPTMP NADP+P/NADH检测试剂盒(购自BioAssay Systems)，20× LumiGLO® 反应液及20× Peroxide (购自cell signalling)。

2.1.2实验动物

选购国家啮齿类实验动物育种中心分公司（上海，中国）的雄性ICR小鼠源!自`优尔'文"论(文`网[www.youerw.com，年龄为8周龄，其体重在31±2g的范围内。设置恒温温度在23°C±1°C的范围内，控制空气湿度为60%，将小鼠置于其中喂养、生活。在08:30–20:30的时间段里将小鼠进行光照，其余时间进行暗处理。一周后，把小鼠随机地分成4组，每组6只小鼠，每组小鼠连续喂养12周，进行以下处理：

control组：每日灌胃玉米油以及0.1% Tween-80；

BDE-47组：每日灌胃BDE-47,剂量为150mg/kg/d；

BDE-47+troxerutin组：每日灌胃BDE-47,剂量为150mg/kg/d；每日灌胃150mg/kg/d的曲克芦丁；

troxerutin组：每日灌胃曲克芦丁，剂量为150mg/kg/d。

2.2实验仪器

荧光显微镜(德国Zeiss，型号Axioskop 40)，冷冻台式高速离心机(德国Eppendorf公司生产,型号为5810R)，紫外-可见分光光度计(日本岛津公司生产，型号UV-2501 PC )，水平电泳槽 (北京六一仪器厂，型号DYCP-31B)，蛋白转印电泳系统(美国BIO-RAD公司)，凝胶成像系统(美国伯乐公司生产，型号Universal Hood II)，SpectraMax M2多功能酶标仪 (美国Molecular Devices公司)，恒温金属浴(杭州大和热磁电子有限公司生产，型号FeroTec HB100)，高速匀浆器(德国IKA公司，型号T10 basic)。