我们对泰山白首乌的醇提部分进行化学成分研究，从其醇提取物的乙酸乙酯萃取物酸水解产物中分离得到7个C21甾体苷元，通过多种光谱技术（包括1H-NMR, 13C-NMR, DEPT, HMQC,HMBC,ESI-MS,HR-ESI-MS等）测定了他们的化学结构，分别鉴定为12-O-苯甲酰基-去乙酰萝藦苷元(12-O-benzoyl-deacetylmetaple-xigenin，1)、12-O-酰基-20-O-(2-甲基丁酰基)-肉珊瑚苷元(12-O-acetyl-20-O-(2-methylbutanoyl)-sarcostin，2)、20-O-乙酰基-本波苷元(20-O-Acetyl-penupogenin，3)。

2 泰山白首乌中C21甾体苷元的分离论文网

2。1 仪器和材料

2。1。1 主要试剂

⑴ 硅胶：正相硅胶 100～200目及200 ～300目，青岛海洋化工厂；Rp-C18硅胶 40～63 m，德国Merck公司。

⑵ 显色剂：10%硫酸乙醇溶液，实验室自制。

⑶ 甲醇：色谱纯，美国天地试剂公司。

⑷ 95%乙醇：分析纯，四川科龙试剂有限公司。

⑸ 乙酸乙酯：分析纯，四川科龙试剂有限公司。

⑹ 甲醇：分析纯，四川科龙试剂有限公司。

⑺ 二氯甲烷：分析纯，四川科龙试剂有限公司。

⑻ 丙酮：分析纯，四川科龙试剂有限公司。

⑼ 石油醚：分析纯，四川科龙试剂有限公司。

⑽硅胶板（100mm×200mm,厚度0。20-0。25mm）,青岛海洋化工厂。

2。1。2 仪器 

⑴ 半制备型高效液相色谱仪：Angilent半制备型高效液相色谱仪，Angilent 1100型泵，G1314型DAD检测仪，Column：Eclipse XDB-C187 m，21。2250 mm，美国Angilent公司。

⑵ 高效液相色谱仪：Agilent1260高效液相色谱仪，Angilent1260型泵，G4212B型DAD检测仪，Column：Poroshell  2。7 m，4。6 mm×100 mm，美国Agilent公司。

⑶ 中压制备色谱仪：PURIFLASH 450型，Interchim公司。 

⑷ 质谱仪：ESI-MS：Angilent 6210 TOF LC/MS，美国Angilent 公司；HR-ESI-MS：Synapt G2 QTOF型，美国Waters公司。

⑸ 核磁共振仪：AVANCE DMX-500型，德国Bruker公司。

⑹ 旋转蒸发仪：Buchi R-210型，瑞士Buchi 公司；SENCO R-1002B型，上海申生科技有限公司；长城科工贸 R-1005型，郑州长城科工贸有限公司

⑺ 电子天平：Sartorius 1700型电子天平，德国赛多利斯公司。

2。1。3 药材

所用药材泰山白首乌根购自安徽亳州药材市场，经浙江省医学科学院李晓誉研究员鉴定为Cynanchum bungei的根。

2。1。4 分离方法

白首乌乙醇提取物以乙酸乙酯萃取得C21甾体总苷，C21甾体总苷经酸水解除去糖部分，经薄层层析、硅胶、Rp-18柱或制备HPLC分离获得高纯度的C21甾体苷元。分离得到的C21甾体苷元化合物，利用核磁共振技术（包括1H-NMR、13C- NMR 等） 确定化合物的类型和结构，根据质谱（MS）或高分辨率质谱（HR-MS）等手段确定分子量或分子式，解析并鉴定化合物的化学结构。

1薄层层析（TLC）

用适当的溶剂将样品溶解，在薄层层析硅胶板距离底端0。5cm处用铅笔轻划一条横线，用毛细管蘸取少量用适当溶剂溶解的样品，在横线上点样，点样直径不大于2mm，点样量不宜超载，静置使溶剂挥干，溶剂挥干后放入层析缸用适当的展开剂展开，再将横线平均分成几等分，放入层析缸后点样点应不被展开剂浸没。展开至距离硅胶板顶端0。5cm处时，取出硅胶板，待溶剂挥发干后喷上显色剂，放入烘箱或碘缸观察实验结果。展开剂为氯仿：甲醇：水（15:3:1），用移液枪分别吸取氯仿15ml，甲醇3ml，水1ml混匀，使用时需摇匀。薄层层析用来做小量样品的定量分析，我们可以通过薄层层析用来确定样品适应的展开剂类型，检测样品中的物质含量定性分析，给柱层析做辅助。