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    在人为控制的条件下, 所进行的各种鱼类毒性试验,不仅可以用于化学品毒性测定,水体污染程度检测,废水及其处理效果检查,而且还可以为制定水质标准、 评价水环境质量和管理废水排放提供科学依据。 由于斑马鱼胚胎技术具有成本低、操作简易、影响因素少、毒性指标丰富、灵敏度高等优点,正逐步成为传统鱼类急性毒性试验的替代手段。
    第二章 纺织废水对绿藻的毒性效应
    2.1.实验仪器
    1.一般藻类实验的实验设备。
    2.实验容器:三角瓶,根据需要可选择一定容量的试验容器,同一批试验的容器应规格一致。
    3.培养设备:使用温度范围为21~25°C±2°C且连续均匀光照,光谱范围为400~700nm的培养箱。
    4.机械振荡器或定时人工摇动若干次。
    5.培养容器应用海绵、海绵塞、滤纸、纱布(2~3层)锡箔纸封闭,挥发性化学品试验时应用磨口玻璃塞完全密闭。
    6.监测细胞浓度的设备,如电子颗粒计数仪、分光光度计、比色计、显微镜、血球计数板、定量吸管(0.1ml)、手动计数器等。
    7.电子分析天平、ph计、高压灭菌锅。
    2.2实验试剂
    藻类培养基
    营养盐    储备液浓度    测试液中终浓度
    贮备液1:常量营养盐
    氯化铵(NH4Cl)
    氯化镁(MgCl2•6H2O)
    氯化钙(CaCl2•2H2O)
    硫酸镁(MgSO4•7H2O)
    磷酸二氢钾(KH4PO4)    
    1.5g/L
    1.2g/L
    1.8g/L
    1.5g/L
    0.16g/L    
    15mg/L
    12mg/L
    18mg/L
    15mg/L
    1.6mg/L
    贮备液2:Fe-EDTA
    FeCl3•6H2O
    Na2EDTA•2H2O    
    80 mg/L
    100 mg/L    
    80μ/L
    100μ/L
    贮备液3:微量元素
    硼酸(H3BO3)
    氯化锰(MnCl2•4H2O)
    氯化锌(ZnCl2)
    氯化钴(CoCl2•6H2O)
    氯化铜(CuCl2•2H2O)
    钼酸钠(Na2MoO4•2H2O)    
    185 mg/L
    415 mg/L
    3 mg/L
    1.5 mg/L
    0.01 mg/L
    7 mg/L    
    185μ/L
    415μ/L
    3μ/L
    1.5μ/L
    0.01μ/L
    7μ/L
    贮备液4:NaHCO3
    NaHCO3    
    50g/L    
    50 mg/L
    纺织废水(采自于南汇某一纺织厂)
    2.3实验过程
    1.先进行藻类培养基,准备20个锥形瓶,和4个广口瓶,按照藻类培养基的配制方法,每一种贮备液配制500ml并放入广口瓶中,取一定比例的四种贮备液,分别加入每一个锥形瓶中,并加100ml去离子水。充分震荡摇匀后,将20瓶去离子水放入高压灭菌锅进行灭菌处理,温度设置为120°C,时间为30min,30min之后取出20个锥心瓶并放入无菌室中。
    2得到纯藻钟后,灭菌后倒入试管,冷却成斜面,然后接种藻类,棉塞封闭,藻类的接种也都在无菌室进行。转接的频率按照绿藻的生长速率来判定,一开始大约每隔1~2月转接一次,经过一段时间以后,绿藻的生长速度明显加快,每周都要进行一次转接。在转接的同时检查储备培养中藻类的生长情况,培养物没有出现畸形生长速度,以及菌类的污染。转接的藻液放入生物实验室中,用白炽灯照明,以加速藻类的生长,并每天对已经转接藻液的锥形瓶进行摇晃,以便藻类充分的吸收养分。
    3.经过一段时间的转接以后,绿藻数量已经达到了一定浓度,取出其中一瓶藻液将上层的清液倒掉,这时藻类的浓度会比较高,在显微镜下,用血球计数板对藻类计数,并进行预实验的操作,预实验的浓度设定为0mg/l,0.1 mg/l,1 mg/l,10 mg/l,100 mg/l。结果如表1所示。
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