山梨酸钾抑制黄曲霉生长的遗传学效应(3)
2.2 倒平板
培养基灭菌后，根据相关资料及预实验结果，设置山梨酸钾的如下浓度，具体配置方法及编号详细见表1。将培养基和称取的防腐剂颗粒放在紫外灯下照射一段时间，待培养基冷却到50 ℃左右，将称量的防腐剂分别倒入6个350 mL的三角瓶中，迅速摇匀，倒平板。每个500 mL三角瓶的培养基分别倒入三个已灭菌的培养皿(直径120 mm)中，并对每个培养皿进行编号，置于超净工作台内，备用。
表1 山梨酸钾用量及不同用量相应编号
防腐剂 编号
1 2 3 4 5 6
容量（mL） 350 350 350 350 350 350
山梨酸钾 浓度（g/mL） 0.00 0.01 0.05 0.2 1.0 2.0
称重（g） 0.00 0.0035 0.175 0.07 0.35 0.7
2.3 黄曲霉孢子悬液的制备
取保存黄曲霉菌种接种于PDA平板上，30 ℃下培养3 d,待黄曲霉长满平板后，再划线活化一次，等黄曲霉再次长满平板后，用无菌生理盐水将固体培养基上活化后的黄曲霉菌孢子冲洗到灭过菌的盛有无菌水的三角瓶内，并进行逐级稀释，同时进行平板菌落计数，直至获得合适稀释度（本实验用灭菌的蒸馏水稀释达到实验用6.0×102 CFU/mL孢子悬液浓度，在含不同浓度山梨酸钾培养基上进行培养的黄曲霉孢子配制的菌悬液的浓度为：山对：1.6×102 CFU/mL，山0.01：2.0×102 CFU/mL，山0.05：1.6×10210 CFU/mL，山0.2：1.7×102 CFU/mL，山1.0：1.1×102 CFU/mL， 山2.0：1.1×102 CFU/mL）。孢子悬液应保存在4 ℃冰箱内供短期内使用。
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