黑木耳多糖提取工艺条件研究(4)
(2)分离纯化
多糖的纯化就是指将粗多糖中的杂质去除而获得单一多糖组分。分离沉淀后获得的多糖提取物中，常会有无机盐、蛋白质以及醇不溶的小分子有机物（如低聚糖）等杂质，必须分别除去。用高浓度的低级醇处理提取液，在提取液中，有机溶剂能够破坏多糖分子周围形成的水化层，使多糖分子因为脱水而相互聚集析出。石油醚、乙醇、乙醚等为植物多糖提取常用的有机溶剂，而乙醇作为沉析剂，原料丰富、价格较低、回收简单、被广泛应用。乙醇容易挥发，在使用时最好在低温环境下进行，一般先将液体冷藏一段时间再进行沉析步骤，在静沉醇沉多糖时，也要放在低温环境下。
（3）多糖的测定
测定多糖含量的方法有蒽酮—硫酸法和苯酚—硫酸法等。多糖的分析检测一般都依靠糖类物质的特征颜色反应。目前常用的黑木耳多糖分析检测方法是苯酚—硫酸法，多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。再以比色法测定为理论基础，该橙色衍生物在490nm处出现最大吸收。该法操作简单，试验温度较低，而且具有快速、试验现象稳定、重现性较好等特点。
1.3 黑木耳多糖的研究进展
多糖是组成生物高分子家族中的一个最丰富多彩的成员，它是由单糖组成的天高分子化合物，已知的天然多糖化合物约有300多种，如真菌多糖，植物多糖，动物多糖，藻类多糖，细菌多糖等，广泛存在于植物，动物和微生物组织中。近代生物化学一直把多糖视做生物体中文持细胞组织结构(如纤文素和几丁质)和提供能量来源(如淀粉和糖元)的物质，没有给予足够的重视，多糖的发展较蛋白质和核酸晚的多，加上多糖本身的极其复杂性，目前研究水平要大大落后于蛋白质和核酸的研究。近二十年来，由于分子生物学和细胞生物学的发展，加上对膜的化学功能，免疫物质的化学研究及新药物资源的研究开发，发现多糖及缀合物参与了细胞中的各种生命活动，具有多种生物学功能。如细胞特异性识别，细胞表面对各种抗原和药物的受体，激活免疫细胞等，因此引起人们极大的兴趣，成为研究的热点[2]。
1.3.1 多糖概述
多糖种类繁多，来源广泛。它广泛存在于动物、植物、微生物(细菌和真菌和海藻中，它们又可分为胞外和胞内多糖。动物多糖来自动物结缔组织基质和细胞间质，是脊椎动物组织胞外空间的特征组分。另外，从动物脾肝中得到的肝素，具有抗凝血的功能；硫酸软骨素则有保护机体组织弹性的作用，可防治动脉硬化和骨质增生等。植物多糖植物多糖来源于植物的根、茎、叶、皮、种子和花。从各种植物中都可分离出多糖。我国近年来对植物多糖，特别是具有中国特色的中草药多糖的药物活性已有广泛的报道，例如，报道降血糖的中草药已达100余种，其中显著效果的有20多种，其它如具有抗肿瘤、抗衰老、抗病毒、抗放射、抗突变、抗凝血等药物活性的报道很多。植物多糖研究比较深入的有：稻草多糖、麦秸多糖、黄芪多糖、刺五加多糖等。微生物多糖微生物多糖包括细菌和真菌多糖，是研究得比较细的一类多糖。与动物和植物多糖相比，微生物多糖具有相似的性质，而且产量和质量不受自然条件的影响。目前国内外从真菌(主要是担子菌纲和子囊菌纲)得到的真菌多糖已达数百种。
1.3.2 真菌多糖的开发利用
近年来研究报道的真菌多糖主要是葡聚糖(Glucan)，菌丝体中多糖；杂多糖和多糖肽等。国内外学者对真菌多糖药用价值进行了深入研究并已形成具有一定生产规模的制剂，其中有的品种已取代了同类进口药品，有的则在国际市场占有了一席之地。
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