手性物质的旋光度和旋光方向可用旋光仪测定。旋光仪主要由一个钠光源、两个Nicol棱镜以及一只盛液管组成,管内装有待测物质。普通光源先经过一个固定不动的起偏镜,使之变为偏振光,根据让偏振光振动平面往右或往左旋转,分别称其为右旋或者左旋[1]。
通过测定物质的比旋光度可通过公式:
                             (1.1.2-a)
计算得出光学纯度(optical purity,即o.p.),一般而言,测定的o.p.值与对映体过量(enantiomeric excess, 简写为e.e.)值相当,均可看作衡量物质立体特异性大小的标准。
手性物质亦可由手性气相色谱柱或者高效液相色谱测定得到。将具有光学活性的单体固定在硅胶或者其他聚合物上而制成的手型固定相称为手性色谱柱。如果要实现手性识别,手性化合物分子与手性固定相之间至少存在三种相互作用:包括氢键、偶级-偶级作用、π-π作用、静电作用、疏水作用或空间作用,手性分离效果是多种相互作用共同作用的结果,这些相互作用通过影响包埋复合物的形成、特殊位点与分析物的键合等而改变手性分离结果。由于这种作用力较微弱,因此需要仔细调节、优化流动相和温度以达到最佳分离效果。其结果可用e.e.值表示,即在手性合成中,生成目标产物(某一种特定的立体异构体)的百分含量减去副产物(另一种异构体)的百分含量,计算公式为
                                     (1.1.2-b)
1.2 获得手性化合物的方法
目前一般认为有三种制备手性化合物的制备方法,主要包括:物理法、化学法以及生物法。
1.2.1 物理法制备
通过物理法来获得手性化合物主要是指拆分消旋化合物,使其中一种对映体结晶从而能够分离得到[9]。主要的方法有:手性溶剂结晶法、手性膜拆分法、接种晶体析解法、晶体机械分离拆分法、色谱拆分法等[4]。其中最适合工业生产的方法为接种晶体析解法:当外消旋体形成的晶体是外消旋混合物时,能够在它的过饱和溶液中,加入某一对映体晶种进行诱晶从而得到该对映体。根据加入晶种方式的不同,可以分成同时结晶和有择结晶。
1.2.2 化学法制备
通过应用化学方法来制备光学活性化的化合物主要有两种:一种是外消旋体的拆分;另一种是潜手性化合物的不对称合成。化学拆分法是将外消旋体转为非对映体,由于非对映体的物理性质不相同,得以把它们分开,最后将分离得到的两种衍生物分别变为原来的旋光化合物。不对称合成需要将不对称因素,如手性试剂、催化剂等引入到反应体系中去,在底物分子上引入手性辅助基团以控制反应的立体选择性需大量手性物质,且操作繁琐,所以化学计量型不对称合成除非应用廉价天然手性源,难以应用到工业生产中[9]。
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