壳聚糖-果香型精油涂膜的抑菌效果及效构关系研究(5)
壳聚糖膜主要是通过阻碍果蔬蒸腾作用和限制果蔬与外界的气体交换起保鲜作用。果蔬表面的壳聚糖膜还可减少果蔬水分丧失和果蔬失重，从而保持其色泽、新鲜度和饱满度，有效地保持果蔬的外观品质。果蔬表面涂抹壳聚糖形成一层透明薄膜，虽然阻碍了大气中氧气的渗入和果蔬呼吸产生C02的逸出，但可使促进果蔬熟化的乙烯气体逸出，形成高C02、低02的环境，从而在果蔬表面达到类似MA的效果，有效地降低了果蔬的呼吸作用，减少其营养消耗，还可以推迟呼吸跃变型果蔬呼吸高峰的到来而延缓后熟，使果蔬保持一定的膨压和新鲜度，减少病原菌侵染口一。有报道表明，壳聚糖处理果蔬能减少采后果实细胞的膜脂过氧化，提高细胞的超氧化物歧化酶的活性和可溶性Ca+的含量，从而推断壳聚糖处理果蔬有利于细胞的稳定性同[21]。
1.4.6壳聚糖-精油涂膜
涂膜构建：壳聚糖-精油薄膜的制备参考Siripatrawan和Harte(2010)[22]的方法。在80℃的水浴锅中，1.0 g壳聚糖用乙酸溶解后加入到100 ml蒸馏水，不断搅拌10-20min直至膜液澄清。然后加入1 ml塑化剂丙三醇（甘油），搅拌40min后冷却到60℃，再加入0.2 ml吐温-80，最后分别加入1.0 g桔子精油，对照组为1.0 g的无菌蒸馏水。上述混合溶液在超声波均质仪下均质30min后作为涂膜溶液，待用。
1.5本课题的研究目的和意义
1.5.1研究目的
橙子表面微生物滋生是引起变质的最主要原因。天然植物精油与壳聚糖结合使用来控制水果采后病变的研究，国内外鲜有报道。使用壳聚糖-精油涂膜，替代其它化学防腐剂延长食品保质期，对于保护生态环境、保证水果安全无毒具有重要意义。具体内容如下：
（1） 体外条件下，研究两种不同提取方法的植物精油的抑菌活性；
（2） 以壳聚糖薄膜为出发物，制备壳聚糖-植物精油复合可降解涂膜；
（3） 体内条件下，研究壳聚糖精油涂膜对橙子腐败的抑菌作用。
1.5.2 研究意义
腐败菌感染柑橘类水果已经对全球的经济以及人类的饮食健康造成了很大的威胁。食品腐败菌可以在大多数环境中生长繁殖，也可在很多原料和加工的食品中生长，如牛奶和奶制品，各类肉制品和新鲜的农产品。由于微生物的生长代谢，会引起食品物理损坏和化学变质，当前也有许多保鲜和延长货架期的技术，包括化学防腐剂，热加工，调气保鲜包装，真空包装和制冷等，但这些都不能从产品上除去腐败菌或者延缓腐败菌的生长。
考虑到化学杀菌剂存在食品安全隐患，研究人员开始但就安全、高效、天然的食品添加剂。植物精油具有很高的防腐去污能力，许多被公认具有光谱抗菌活性。
2正文
2.1实验材料
2.1.1植物精油
冷榨型桔子精油、蒸馏型桔子精油购买自上海云峰香精有限公司，封装在白色塑料箱中，冰箱4℃储藏，备用。
2.1.2水果
新鲜橙子，选购自当地水果市场。选取无外伤、无病害，外观、大小和成熟度基本一致的橙子用于实验。运回实验室当天先用清水洗净，室温自然晾干。实验处理前，再用0.1%次氯酸钠溶液浸泡消毒，晾干后使用。
2.1.3病原菌和培养基的准备
意大利青霉（Penicillium.italicum），上海应用技术学院微生物实验室保藏。使用菌种前用PDA斜面培养基在28℃培养7d，用接种环从PDA斜面上挑取一环活化后的病原菌，至离心管内用一定量的无菌室稀释，形成包子悬浮液，待用。
PDA培养基（马铃薯葡萄糖琼脂培养基）：200g去皮马铃薯加水煮沸，30，min后用纱布过滤，滤液中加入20g葡萄糖和20g琼脂，用蒸馏水定溶至1L，121℃灭菌20min，待用。