强化超积累植物东南景天萃取镉的微生物菌株筛选(3)
本实验以期通过耐镉、产酸、产IAA及固氮等性质筛选得到预期供试菌株，通过植物微生物组合盆栽实验验证供试菌株对超积累植物东南景天萃取土壤镉存在促进作用。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1菌株
矿区污染地植物根际土壤中提取的供试菌株。
1.1.2培养基
低氮培养基：硝酸钙0.03 g 磷酸氢二钠0.15 g 氯化钙0.1 g 硫酸镁0.12 g
磷酸二氢钾0.1 g 柠檬酸铁0.05 g 微量元素1 mL（硼酸2.86 g 硫酸锰1.81 g 硫酸铜0.8 g 钼酸0.02 g 水1 L）pH 7.2 琼脂 20 g 水1 L
有氮培养基：蔗糖10 g 硫酸铵1 g 七水合硫酸镁0.5 g 氯化钠0.1 g 磷酸氢二钾2 g 酵母膏0.5 g 琼脂15 g 水1 L pH7.2
琼脂称量后加入分装容器，不加入配制容器，液体培养基则不加琼脂
测IAA培养基：配置有氮液体培养基，高温蒸汽灭菌后，加入配置好的已过滤灭菌的2.5 mg.mL-1色氨酸溶液1 mL即可
LB培养基：蛋白胨10 g 琼脂粉5 g 氯化钠10 g 水1 L pH 7.0
1.1.3试剂
1 mMCdCl2溶液: 1 mmol的固体CdCl2溶于1 L去离子水
0.5%溴百里酚蓝：取溴代麝香草酚蓝1 g，加0.05 mol.L-1氢氧化钠溶液43 mL
使溶解，加水定容至200 mL
2.5 mg.mL-1色氨酸溶液：黑暗环境避光配置，0.25 g色氨酸固体结晶少量去离子水溶解，必要时加热搅拌加速溶解，定容至100 mL
Sackowki’s显色剂：150 mL浓硫酸溶于250 mL去离子水，加入7.5 mL0.5 mol.L-1优尔水合氯化铁溶液[24]
0.01 MCaCl2溶液:称取1.11 g CaCl2固体溶于1 L去离子水即可
2.5%纯硝酸:取37.5 mL优级纯硝酸入去离子水，定容至1 L，配制2.5%HNO3；参考此法配置其他浓度硝酸溶液
优级纯高氯酸：优级纯酸，消煮专用酸的配比