超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)是生物体抗氧化酶防御系统的主要成分,功能为清除生物体内的活性氧自由基。目前在重金属离子对水生动物的毒理学研究中,许多学者已经把抗氧化酶作为生物体氧化胁迫和损伤的标志物。铅(Pb)、铬(Cr)具有很强的毒性,是作用于生物体全身各个系统和器官的有毒元素,并与体内一系列蛋白质、酶和氨基酸中的功能团(如琉基)结合,干扰机体的正常生理和生化活动[2]。Pb、Cr能促进活性氧自由基(ROS)的产生,使机体处于氧化应激状态,从而影响解毒酶的活性与分泌[3]。水域水质监测多以原生动物为主,水生昆虫在水质监测中的应用研究较少,尤其是重金属对水生昆虫的影响研究则更少,有必要研究重金属污染对水生昆虫的影响,为利用水生昆虫监测水体重金属污染提供理论依据。
前期调查发现,杭州市西溪湿地、虎山水库和农田水系(萧山区文伟村水稻田)等三种典型水体都存在一定程度的重金属污染(见表1)。
表1西溪湿地、虎山水库和文伟村农田三地夏季水体重金属浓度来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766
Table 1 heavy metal concentration of XiXi Wetland, and Hushan Reservoir and the WenWei Village farmland
参数 西溪湿地 虎山水库 农田
Cu2+/mg/L 0。0808 0。0717 0。0668
Zn2+/mg/L 0。0921 0。0885 0。1108
Cd2+/mg/L 0。0026 0。0022 0。0015
Cr6+/mg/L 0。0970 0。0441 0。0557
根据农田灌溉水质标准[4](GB5084-2005)。可以看到农田水系的Cu2+、Zn2+、Cd2+和Cr6+都达到农田灌溉水的标准,但Cu2+和Cr6+的含量已接近农田灌溉水质标准所允许的最高标准。根据地表水环境质量标准[5](GB3838-2002)。可以看到虎山水库在重金属含量方面达Ⅱ类水质,主要适用于集中式生活饮用水地表水源地二级保护区;西溪湿地Cu2+、Zn2+、Cd2+达到地表水环境质量标准Ⅱ类水质标准,但六价铬离子(Cr6+)浓度为0。097mg/L,浓度超标,达到Ⅴ水质标准,属于农业用水区及一般景观要求水域范畴。
在以上调查数据和相关水域质量标准的基础上,进一步设计六价铬离子(Cr6+)浓度梯度,白尾灰蜻稚虫暴露于不同浓度的(Cr6+水培液中,测定重金属离子Cr6+对白尾灰蜻SOD、CAT、GSH-PX等解毒酶活性的影响。
1材料与方法
1。1试验材料
1。1。1 供试昆虫
试验中的白尾灰蜻Orthetrum albistylum Selys稚虫采集于杭州师范大学下沙校区内水塘,在实验室内用洁净水饲养一段时间后,选取大小相似的健康稚虫作为实验对象。
1。1。2 白尾灰蜻Orthetrum albistylum Selys稚虫采样
白尾灰蜻稚虫的采集均用D形抄网(0。 3 m宽,40目尼龙纱),在池底中采样,采样面积约1。 5 m2左右,采样时将网前约5m内的底质采集,用刷子和镊子刷下和挑拣出碎石和底泥中的白尾灰蜻稚虫;同时,并根据实际情况,采集附近石块和圆木以及枯枝落叶,采集附着的白尾灰蜻稚虫,放入塑料桶(盛约2L池塘水,并放入一些枯枝落叶)。将采集到的白尾灰蜻稚虫放于采集器中带回。